第81集、圖解「螢光免疫標記技術」

2021-01-10 騰訊網

親們,大家好

我是小潤

你以為免疫是一門高深的理論課?

不,它其實是一門美術課。

其實每種標記技術的過程都很相似

就像

小潤以螢光為例給大家分析一下

這裡必須強勢插幾道題目

這幾道,經常考

1、FITC的螢光色澤為

2、四乙基羅丹明的色澤為

3、TRITC的色澤為

4、藻紅蛋白

A. 橘紅色螢光

B. 黃綠色

C. 橙紅色

D. 橙色

E. 黃色

各位小朋友,

是不是對著上面的圖都得找好幾遍

異硫氰酸螢光素是必需要會的,必考的——黃綠色螢光

「大橘乙定」——四乙基羅丹明——橘紅色螢光

「橙甲立業紅彤彤」——四甲基異硫氰酸羅丹明——橙紅色螢光

「藻橙正果」——藻紅蛋白——橙色螢光

理解順口溜之後,是不是感覺整個世界都明亮了

好啦!

大家在複習的時候可以品品

是不是免疫標記技術都差不多是這個套路呢

特別在學習這一章節的時候

一定要自己多畫畫

這期就到這裡啦

下期我們再見

愛你的小潤老師

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  • 螢光蛋白種類和螢光蛋白標記技術
    螢光蛋白標記技術蛋白標記的主要目的是監測生物過程、輔助檢測(例如化合物的可靠定量、蛋白質修飾的特異性檢測)或者純化標記後的蛋白及其結合對象。蛋白質的標記能夠提高檢測靈敏度以及簡化檢測工作流程。目前有多種蛋白質標記技術來幫助我們研究感興趣的蛋白質的豐度、位置、相互作用、翻譯後修飾、功能,乃至監測活細胞中的蛋白質運輸等問題。
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    洗滌除去未結合物,接著加入螢光標記的抗體,使之與抗原特異性結合,形成抗體—抗原—抗體複合物。最後根據螢光強度,即可對蛋白抗原進行定量。  傳統的螢光免疫法受本底螢光的幹擾較大,時間分辨螢光免疫測定法是以具有特長壽命的稀土金屬如銪,作為標記物,加入正常液後激發測定,能有效去除短壽命本底螢光的幹擾。
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    免疫螢光技術就是將不影響抗原抗體活性的螢光色素標記在抗體(或抗原)上,其與相應的抗原(或抗體)特異性結合後,用特定儀器可使特異性的螢光物質被定位和定量識別
  • 免疫螢光染色技術
    甘油有減少非特異性螢光的作用。PBS液3×3ˊ衝洗;③再加螢光標記的抗抗體,主要以兩個指標判斷結果,一個是形態學特徵;另一個是螢光的亮度,在結果的判定中,必須將二者結合起來,綜合判定。(六)標本保存由於螢光色素和蛋白質分子的穩定性都是相對的,因此隨著保存時間的延長,在各種條件影響下,標記蛋白可能變性解離,失去其應有的亮度和特異性
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  • 第三節 免疫螢光細胞化學染色方法
    第三節 免疫螢光細胞化學染色方法   一、標本製作   可製作塗片、印片、細胞單層培養物、組織切片,經適當固定或不固定,作免疫螢光染色用。②染色抑制試驗(一步法):將螢光抗體和未標記的抗體球蛋白或血清(相同)等量混合,如上法處理切片。結果應為陰性。為證明此種染色抑制不是由於螢光抗體被稀釋所致,可用鹽水代替未標記抗血清,染色結果應為陽性。此法結果較二步法穩定。③類屬抗原染色試驗,前面已作敘述。   直接法比較簡單,適合做細菌、螺旋體、原蟲、真菌及濃度較高的蛋白質抗原如腎、皮膚的檢查和研究。
  • 如何用FITC螢光標記細菌(細菌與真菌的螢光素標記)
    真菌;醋酸菌螢光(GFP)標記細菌螢光染色標記細菌(fluorescence labeled bacteria,FLB)>螢光標記噬菌體技術螢光蛋白標記細菌AlexaFluor 488(AF488)螢光染料標記細菌綠色螢光蛋白基因pEGFP標記細菌
  • 運用綠色螢光蛋白標記技術 鯖鱂魚和斑馬魚胚胎遇毒發光
    日前,在2019中國化妝品國際高峰論壇上,記者獲悉,運用綠色螢光蛋白標記技術,通過鯖鱂魚和斑馬魚,可以快速檢測出上千種毒素,魚胚胎遇到有毒物質之後,身體會發出綠色的螢光。據悉,這種可視化魚胚胎生物檢測技術正準備運用到越來越多的功效檢測中,如空氣品質、化妝品美白、抗衰老等功效。
  • 免疫螢光(Immunofluorescence, IF)實驗方法、原理、具體操作步驟和注意事項
    免疫螢光技術是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。它是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上螢光基團,再用這種螢光抗體(或抗原)作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。利用螢光顯微鏡可以看見螢光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質和定位,以及利用定量技術(比如流式細胞儀)測定含量。