B肝顆粒附著細胞表面，詳解硫酸肝素蛋白多糖，低親和力結合

科學家必須弄清楚B肝病毒（HBV）進入細胞的機制，才能夠基於這項靶點開發HBV進入抑制劑。將根據B肝病毒顆粒是附著於細胞表面和硫酸肝素蛋白多糖的低親和力結合，詳細介紹B肝病毒進入機制。

B肝顆粒附著細胞表面，詳解硫酸肝素蛋白多糖，低親和力結合

硫酸乙醯肝素蛋白多糖（HSPGs）是一種糖蛋白，含有1條或多條硫酸乙醯肝素鏈，存在於幾乎所有細胞的細胞表面和細胞外基質中。熱休克蛋白具有重要生理功能，並與許多病毒（包括單純皰疹病毒、人乳頭瘤病毒和登革熱病毒等）粘附到細胞中有關。HBV進入宿主細胞，需要與HSPGs的低親和力結合，然後是與病毒受體的高親和力結合。

這些研究結果由法國圖爾大學的Charline Herrscher、Philippe Roingeard、Emmanuelle Blanchard發表在Cells雜誌上，這些證明是基於肝素，一種糖胺聚糖（GAG）對B肝病毒附著的幹擾。與硫酸化程度較低的硫酸軟骨素相比，高硫酸化抑制劑能更有效地阻斷B肝病毒與細胞結合。這一結果表明，HBV只與主要存在於肝細胞表面的高硫酸化熱休克蛋白相互作用，而不與內皮細胞和真皮細胞表面硫酸化程度較低的熱休克蛋白相互作用。

此外，最近法國研究人員觀察表明，HBV優先結合glypican 5，一種在肝臟中強烈表達的HSPG，這可能部分解釋了HBV的強肝向性作用。然而，這些結果並不能解釋HBV如何避免與HSPGs結合，並在到達肝臟之前，被隔離在其他細胞中！最近，HBV病毒離子在結合HSPGs的能力方面，有2種不同的構型。與HSPG的結合，是通過帶負電的HSPG與存在於所有HBV包膜蛋白中的S結構域抗原環區域中的2個帶正電荷的殘基（Arg122和Lys141）之間的靜電相互作用介導的。

這種低親和力的相互作用，可以穩定細胞表面的病毒，促進B肝病毒與受體的高親和力結合。B肝在研新藥之一開發靶點，HBV進入抑制劑是使用在B肝病毒生命周期的早期階段治療的研究藥物，因為B肝病毒與肝細胞膜上的硫酸乙醯肝素蛋白多糖（HSPGs）相互作用，尤其是glypican 5。B肝病毒與其受體牛磺膽酸鈉共轉運多肽（NTCP）及其共受體表皮生長因子受體（EGFR）結合。

這種內化複合物與N-糖基化NTCP相關的E-鈣粘蛋白。這種結合，允許NTCP重新定位到質膜上。HBV-NTCP-EGFR複合物，通過網格蛋白介導的內吞作用進入細胞。而表皮生長因子受體（EGFR）分選機，在內質體網格中協調HBV的轉運。可能是由於某些內部融合的存在而導致了B肝病毒的不完全融合。觸發內體融合的線索尚待明確闡明。

在內質逃逸後，游離核衣殼被認為是利用微管網絡轉運到細胞核，在核孔複合體處解離。一旦進入細胞核，鬆弛的環狀DNA轉化為cccDNA，作為B肝病毒轉錄模板！2012年，Yan等人確定了NTCP是HBV和HDV病毒的受體，這一發現得到了Ni等人的獨立證實，他們比較了分化和未分化HepaRG細胞的基因表達譜，並證明NTCP基因敲除阻斷了HBV感染。此外，人或樹狀NTCP的外源性表達，使肝癌細胞株對HBV感染敏感。這些都揭示了，使肝癌細胞易受B型肝炎病毒感染過程。

NTCP由SLC10A1基因編碼，這種蛋白質主要位於肝細胞的基底外側膜上，負責從血液中攝取結合膽汁酸。NTCP在中分化到高分化的HCC中表達，但在低分化HCC中不表達。在大多數人類肝臟疾病中，其表達下調。分離原代人肝細胞後，NTCP表達迅速丟失。這些觀察結果，可以解釋為什麼惡性肝癌細胞不支持HBV和HDV感染，以及為什麼原代肝細胞在分離後，僅幾天內易受HBV感染。

小番健康結語：以上是法國圖爾大學3位研究人員對B肝病毒進入細胞的機制詳解，雖然也許將令行業外人士感到晦澀難懂，簡單的講，科學家已經深入探明B肝病毒生命周期的早期事件，為B肝病毒顆粒附著於細胞表面給出最新科學研究解讀（2020年6月18日 Cells）。