B肝篩選靶點，宿主細胞參與HBV內化，受體結合介導內吞作用

篩選靶點十分繁瑣嚴格，HBV進入抑制劑是目前開發慢性B肝新藥方向之一。眾所周知，病毒會與多種宿主相互作用以啟動進入。例如，C肝病毒能與至少14種宿主細胞因子相互作用，以確保有效的細胞感染。但目前科學家對於B肝病毒進入所需的共受體和宿主細胞因子尚未完全闡明。已知被發現的是NTCP對B肝病毒有效感染是必要的，但還不夠。

B肝篩選靶點，宿主細胞參與HBV內化，受體結合介導內吞作用

B肝病毒進入需要通過NTCP與肝細胞結合後，才能夠進入細胞，這一發現揭示了宿主細胞因子參與B肝病毒內化過程。法國圖爾大學研究人員認為，這種B肝病毒進入被認為是通過內吞作用發生的。然而，NTCP介導B肝病毒進入的詳細機制仍有待確定，目前還不清楚B肝病毒在細胞滲透過程中，是否與其他受體相互作用。

法國研究人員發現，實際上，在過度表達NTCP細胞系匯總，感染效率仍然相對較低。這些觀察結果表明，可能通過形成複雜的、多步驟的進入過程，對B肝病毒感染的易感性需要額外的宿主因子。在最近的一項研究確定表皮生長因子受體（EGFR）是一種啟動B肝病毒內化宿主進入輔助因子。與這一發現相一致，HepG2細胞系的EGFR水平明顯低於其他肝細胞系，這可能是其低感染率的原因。

在另一項研究中顯示，在B肝病毒進入時，宿主細胞蛋白E-鈣粘蛋白是一種鈣依賴性細胞粘附蛋白。E-cadherin通過影響NCTP的分布，在B肝病毒進入過程中起著重要作用。事實上，這種蛋白質與糖基化的NTCP結合併促進NTCP重新定位到基底外側質膜。細胞極化，被描述為B肝病毒產生性進入的一種強制性機制。

由於細胞極化誘導細胞-細胞粘附蛋白（如E-cadherin）的重新定位到質膜上，這一觀察結果，可部分解釋為E-cadherin對B肝病毒攝取的重要性。有趣的是，與此相反，細胞極化限制了C肝病毒通過緊密連接的進入，形成物理屏障並限制病毒進入受體。目前看來，B肝病毒進入細胞是一種開發B肝新藥的重要靶點，基於科學家對該方面的更多探索，有必要詳細介紹一下，關於受體結合介導的內吞作用。

這個學術名稱雖然聽起來十分難懂，實際上，上述機制指的就是一旦與受體和輔助受體相互作用，B肝病毒就會進入細胞。自從發現NTCP以來，這一步驟所涉及的機制變得更加清楚。已證明肝小窩中的ARG-21介導的感染途徑，可遵循HBV-21介導的進入途徑。然而，2020年6月Cells上這項法國圖爾大學研究人員發表的研究觀點卻指出，先前的一項報告說，用小窩介導的內吞作用的化學抑制劑治療原發性Tupaia肝細胞（PTH）不會損害B肝病毒感染。

一些研究報告了相互矛盾的結果，支持使用網格蛋白介導的內吞作用（CME）HBV進入細胞。事實上，HBV包膜蛋白的preS1結構域，在進入永生化的人原代肝細胞時與網格蛋白和蛋白適配器2（AP-2）相互作用。這一結果通過沉默網格蛋白重鏈（CHC）和AP-2而得到證實。HBV進入的後續步驟的基本機制，最近才在NTCP過度表達的肝癌細胞中被直接研究，這是一個解釋HBV攝取機制的有趣工具。

圖爾大學研究人員介紹，2018年進行的一項研究調查了HBV進入HepG2 NTCP細胞的情況，並顯示水飛薊賓（一種已知的抑制網格蛋白介導的內吞作用的藥物）減少了HBV進入。與這一結果一致，最近的一項研究證明了AP-2和EPS15銜接蛋白參與了HepG2 NTCP細胞和PHH感染HBV。與這兩項研究結果一致，另一項研究表明，沉默HepG2 NTCP細胞中的caveolin-1並不能減少HBV感染，而CHC、dynamin-2（DNM2）和AP-2的沉默導致感染水平大大降低。

此外，在這項研究中，電子顯微鏡分析顯示HBV顆粒存在於早期感染的網格蛋白包被的囊泡中。其他幾條證據支持CME是HBV體內進入的主要途徑。事實上，CME已經被證明在肝細胞、鐵穩態、肝脂肪變性和病毒誘導的肝感染中，發揮了許多重要作用。除了作為HBV的受體，NTCP還具有吸收膽汁鹽的生理功能，並通過CME循環到質膜上。這就是目前科學界掌握的受體結合介導的內吞作用（2020年6月18日 Cells 法國圖爾大學Charline Herrscher、Philippe Roingeard、Emmanuelle Blanchard）。