液氮凍存細胞應注意哪些問題

當我們的液氮罐內存放細胞的時候，需要在低溫液氮的環境下才能維持細胞的活性，但是細胞長的太過培養液出現很黃的現象，細胞可能出現汙染現象，這時候細胞已經開始凋亡或者崩解。遇到這類現象我們應該採用哪種方法解決呢？

凍存管

細胞常見問題：

1：存放的細胞濃度過低（1-5乘以1000000/ml）的時候，需要離心後調整細胞濃度。

2：凍存管的蓋子一定要擰緊，防止復甦水浴的時候滲水現象，造成二次汙染，選擇管子或者蓋子的時候儘量選擇原裝的。

3：凍存盒過於單薄，細胞被迅速降溫，應選擇厚的泡沫塑料盒，或者塞入大量幹棉花，這樣降低細胞溫度變化幅度大。

4：液氮面應該高於細胞界面，這樣才能維持活性。

5：為了防止錯拿細胞，每支凍存管上都標上細胞名稱及時間，做好記錄。

液氮罐

細胞復甦：

1：取出凍存管後，直接放入37攝氏度的溫水中，不時搖晃讓其儘快融化。

2：取出的凍存管打開後使用吸管吸出細胞液，加到離心管滴加10倍以上的培養液混合均勻。

3：去除上清液，加入10%小牛血清培養液重懸細胞，調整細胞密度，在37攝氏度的培養箱中培養。

4：次日更換一次培養液，繼續培養。