責編 | 逸雲
生長素是一類重要的植物內源激素,其參與調控植物多種生命進程。生長素信號通路的轉錄調控依賴於生長素響應因子(AUXIN RESPONSE FACTOR ,ARF),ARF能夠與生長素響應基因的順式作用元件(AuxRE)結合進而調控相關基因表達【1-2】。大部分ARFs含有三個保守的功能結構域,即一個位於N端負責DNA結合的功能域(DBD)、一個位於C末端負責蛋白之間相互作用的PBI功能域和一個位於中間部位負責轉錄調控活性的功能域。先前研究已經鑑定出了兩個AuxRE重複序列,分別是5′-TGTCGG-3′和 5′-TGTCTC-3′【3-4】。然而到目前為止,ARF如何識別AuxRE重複序列以及如何選擇性的結合不同的AuxRE重複序列去調控生長素應答基因的表達卻仍不清楚。
近日,荷蘭瓦赫寧根大學(Wageningen University)Dolf Weijers研究團隊在PNAS上發表了一篇題為Architecture of DNA elements mediating ARF transcription factor binding and auxin-responsive gene expression in Arabidopsis 研究論文, 揭示了擬南芥中ARF如何高親和力結合AuxRE進而調控生長素信號通路。
本研究中,為了探究5′-TGTCNN-3′重複序列中最後兩個核苷酸如何影響ARF-DNA的結合,研究人員分析擬南芥AtARF1-DBD的結構發現ARF二聚體能夠隨著AuxRE重複序列的不同而發生改變,並根據靠近TGTC核心附近的鹼基序列而發生局部構象改變。先前研究發現擬南芥TMO5(TARGET OF MONOPTEROS 5)是ARF5的一個目標基因【5】。研究分析TMO5啟動子區域ARF5基因所結合的2個AuxRE-like 功能域表明,ARF二聚體與AuxREs元件高親和力結合去調控基因表達活性。
進一步全基因組分析生長素響應的反向重複序列(IR)和正向重複序列(DR),研究人員發現了兩個關鍵的AuxRE重複序列,分別為DR5和IR8,其中DR5與基因激活顯著相關,而IR8與基因激活和抑制顯著相關。並且,這兩個重複序列與生長素響應基因表達情況更相關,甚至超過生長素響應基因與5′-TGTCGG-3′重複序列之間的相關程度。此外,研究人員還發現DR5和IR8兩個元件在生長素應答基因中廣泛存在,並且,ARF5和ARF1與IR8結合的親和力都強於與DR5結合的親和力。
圖 單分子螢光共振分析不同的ARF-DNA親和力
綜上所述,研究人員深入分析了擬南芥ARF高親和力結合不同的AuxRE重複序列,表明ARF所識別位點處的重複序列是其發揮調控功能的關鍵元件,並揭示了此不同重複序列表現出不同分子活性的分子機理。
參考文獻:
1. A. W. Woodward, B. Bartel, Auxin: Regulation, action, and interaction. Ann. Bot. 95, 707–735 (2005);
2. H. Kato, R. Nishihama, D. Weijers, T. Kohchi, Evolution of nuclear auxin signaling Lessons from genetic studies with basal land plants. J. Exp. Bot. 69, 291–301 (2018);
3. D. R. Boer et al., Structural basis for DNA binding specificity by the auxin-dependent ARF transcription factors. Cell 156, 577–589 (2014).
4. R. C. O』Malley et al., Cistrome and epicistrome features shape the regulatory DNA landscape. Cell 165, 1280–1292 (2016);
5. A. Schlereth et al., MONOPTEROS controls embryonic root initiation by regulating a mobile transcription factor. Nature 464, 913–916 (2010).
文章連結:
https://www.pnas.org/content/pnas/early/2020/09/10/2009554117.full.pdf