DNA聚丙烯醯胺凝膠電泳介紹——萬融實驗

（一）操作規程

1.清洗裝配　用去汙劑、水洗淨玻璃板，晾乾。然後按照要求裝好。洗滌及裝配玻璃板時必須戴手套。

2.制膠　確知玻璃板的大小和間隔片的厚度，可以得知所需丙烯醯胺溶液的體積（100mL不同濃度凝膠的製備，參見表2-1）。

表2-1　製備聚丙烯醯胺凝膠所用試劑的體積

3.聚合　立即插入適當的梳子。室溫下靜置聚合5～20分鐘。

4.上樣　向電泳槽中加入電泳緩衝液，小心拔出梳子。用電泳緩衝液衝洗點樣孔。然後上樣。

5.電泳　開始時電壓為8V/cm凝膠，染料泳動至膠底約1cm時，停止電泳。

6.分析　取下凝膠，切除凝膠的一角作為標記。染色、分析。

（二）注意事項

1.電泳前　整個操作過程中必須戴手套，未聚合的丙烯醯胺為神經毒性，可通過皮膚吸收，其作用具累積性。聚合的丙烯醯胺無毒，但也應戴手套，因其可能含有未聚合材料。灌注凝膠時要防止凝膠的洩漏，灌注前可用水測試一下。一定要檢查電極的連接，正負極要對應。要先倒電泳緩衝液，然後上樣，再設定電泳條件接通電源。調電流電壓時，不要超出額定範圍。

2.電泳時　電泳過程中會產生大量的熱，應將電泳槽放入冷藏室或冰上進行電泳。在電泳過程中，電泳裝置如有異常發熱，立即關閉電泳儀。

3.電泳後　取出凝膠時要非常小心，以免凝膠破裂影響分析。