SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳(PAGE)操作步驟

　　SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳(PAGE)操作步驟

　　1.按圖安裝玻璃板

　　2.按表製備分離膠(10%)，將分離膠混勻後立即灌注於玻板間隙中，上層小心覆蓋一層乙醇，將膠板垂直放於室溫下，待分離膠聚合完全後，傾去上鋪乙醇，用濾紙吸乾。

　　3.製備濃縮膠(4%)：將濃縮膠混合後直接灌注在已聚合的分離膠上，立即插入梳子，將凝膠垂直放於室溫下聚合。

　　4.樣品處理：在濃縮膠聚合時，取樣品與等體積樣品緩衝液混合，100℃加熱1-2min。

　　5.待濃縮膠聚合完全後，小心移出梳子，然後將膠板固定於電泳裝置上，上下槽各加入電泳緩衝液。

　　6.加樣：用微量進樣器加樣，每個樣品加入20μl。

　　7.電泳：在100-150V恆壓下電泳，直至溴酚藍達到膠底部，關閉電源。

　　8.染色：從電泳裝置上卸下玻板，小心橇開玻板取出凝膠，放入染色液中染色2h以上。

　　9.脫色：移出凝膠放入脫色液中脫色至本底無色為止。

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