new!—— 新型SDS-PAGE蛋白電泳緩衝液

2021-02-23 欣博盛生物

AllView PAGE Buffer是一種新型的SDS-PAGE蛋白電泳緩衝液。這款緩衝液具有一個顯著的特點就是能夠在鹼性的Laemmli凝膠（Tris-HCl）中分離不同分子量大小的蛋白質，類似於「梯度凝膠」的使用。建議使用丙烯醯胺濃度為6%的分離膠和3%的濃縮膠，以分離分子量約在10kDa至250kDa的範圍的蛋白。電泳後的聚丙烯醯胺凝膠可直接用於CBB染色、銀染或western印跡。

● 節省成本和時間（不需要梯度凝膠）

● 使用mini gel只需13分鐘即可完成電泳

● 適用於之後進一步的分析實驗:例如CBB染色、蛋白質印跡等

1.用超純水將20×的AllView PAGE Buffer稀釋至1×工作液。（例如，取25ml的AllView PAGE Buffer到475ml 的超純水中.）

2.將凝膠放入電泳槽中。

3.將1×AllView PAGE Buffer注入電泳槽中。

4.點樣以及加入蛋白marker

5.開始電泳，電泳條件設置如下。

Gel

Voltage

Time

Mini gel (8× 10cm, 

1mm thick)

250V (Constant 

voltage)

13-15min

● AllView PAGE Buffer適用於Laemmli凝膠（見下文「推薦用法」）。

● 如果使用預製凝膠，則最佳丙烯醯胺濃度可能不同。

● AllView PAGE Buffer不可重複使用。

● AllView PAGE Buffer是20×原液。使用前請稀釋至1倍工作液。

● 如果觀察到SDS沉澱，使用前將其放在水浴（約37°C）中使其完全溶解。

● 最佳電泳時間取決於丙烯醯胺濃度、凝膠大小和電壓。

● 建議使用MW Marker作為標記。(e.g. DynaMarker® Protein MultiColor Stable II, Code#DM660).

建議丙烯醯胺的濃度為6%的分離膠和3%的濃縮膠，以分離分子量大概10kDa至250 kDa範圍的蛋白。特別是在需要分離低分子量蛋白質（10kda~30kda）的情況下，建議使用10%的分離膠。

1. 準備膠 (Laemmli’s method)  

表1，聚丙烯醯胺分離膠和濃縮膠配方（2 mini gels）


Stacking gel (6ml)

Resolving gel 

(15ml)

Gel 

percentage

3%

6%

10%

Ultrapure 

water

3.9ml

8.05

6.05

1.5M 

Tris-HCl 

(pH8.8)

1.5

3.75

3.75

30%Acrylamide

/Bis solution

0.6

3

5

10%SDS

0.06

0.15

0.15

TEMED

0.003(3µl)

0.00375(3.75µl)

0.00375(3.75µl)

10%APS

0.06

0.05

0.05


上圖為 DynaMarker® Protein MultiColor Stable II, Code#DM660

2.電泳圖

AllView PAGE Buffer與Laemmli electrophoresis running buffer（Tris-Glycine-SDS）的使用區別在於蛋白質遷移率不同。通過對AllView PAGE Buffer和Laemmli gel（Tris-HCl）的結合使用，可以像梯度凝膠一樣分離大範圍的蛋白質大小，如下圖。

訂購信息：

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產品名稱

規格

DS520

AllView PAGE 

Buffer

500ml(20×stock 

solution)

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