石蠟切片中番紅、固綠染色的相對問題

番紅、固綠是植物製片過程中，最常用的兩種染料，經過兩者染色後，材料的木質化細胞壁呈紅色，纖維化細胞壁、胞漿等組織呈現綠色，紅綠對比鮮明，便於對不同的組織進行觀察研究。但在實際操作過程中，往往很難達到理想的染色狀態，即使像常規的玉米莖、向日葵莖，初學者很容易出現番紅顏色過淺，或者固綠顏色過淺的現象，這往往是兩者染色的相對性引起的，即一種顏色過重，會導致另一種顏色染不上或過淺。就拿番紅來說，目前的切片製作者，都會在材料脫水透明前，用50%的酒精番紅溶液對材料進行整體染色，除了番紅染料專一性的木質化組織外，其他組織如纖維化細胞壁、胞漿等，同時也會被番紅著色，當材料經脫水透明包埋，最終切成片，依次經過各級酒精後片染固綠時。

若此時材料整體仍為鮮紅色，則固綠的染色效果會很差，甚至染不上顏色，則需要將材料在水中，或者低濃度酒精中稍放置幾分鐘，使番紅的顏色褪去些許，再進行染色方可。因此有經驗的生產者，在復染固綠時，會根據材料上番紅的整體狀態，判斷固綠的染色效果。

若材料經各級酒精後，整體仍為鮮紅色，則固綠著色效果必然很差；當材料除木質部以外，整體呈現粉紅色時，其他組織上的番紅，能夠在固綠中自動分色，使固綠的著色效果達到最佳。

除此對幼嫩的材料，如各種幼根、嫩葉片來說，往往因為中心導管的木質化程度不高，使得番紅著色很淺，甚至不著色，對於這種情況，一方面我們需要從材料的源頭把握材料，確保在植物最合適的生長時期取材；另一方面，則需要儘量縮短材料在各級酒精中的脫水時間，以及把固綠的濃度調到儘可能低，避免固綠覆蓋掉番紅的顏色。