「AbMole科研」異丙酚下調穀氨酸誘導的PC12細胞發揮神經保護作用

2021-01-09 AbMole生物

AbMole精研抑制劑十年,最新的科研動態不斷與您分享。本期與您分享的是:異丙酚通過下調穀氨酸誘導的PC12細胞中的microRNA-19a發揮神經保護作用

異丙酚是一種經認證的、具有抗炎、抗腫瘤作用的靜脈鎮靜劑。但異丙酚在腦損傷中的作用及其機制尚不清楚,因此是本文的研究重點。

具體來說,研究人員用異丙酚處理PC12細胞,並暴露在穀氨酸(Glu)溶液中。通過CCK-8、流式細胞術和western blot檢測細胞活力、凋亡電位、凋亡相關蛋白和自噬連接蛋白。螢光定量PCR檢測miR-19a在受糖刺激細胞中的表達。接下來,研究人員使用miR-19a模擬轉染來評估miR-19a在Glu或異丙酚處理的細胞中對細胞凋亡和自噬的影響。最後通過western blot檢測AMPK和mTOR通路。

暴露於Glu促進了PC12細胞的凋亡和自噬,而異丙酚則減弱了Glu觸發的細胞凋亡和自噬。此外,異丙酚降低了miR-19a在谷蛋白刺激的PC12細胞中的表達。同時,過表達miR-19a逆轉了異丙酚對糖誘導的細胞凋亡和自噬的影響。此外,異丙酚通過阻礙miR-19a的表達,增強了受谷蛋白刺激的PC12細胞中的AMPK和mTOR通路

CCK-8試劑盒 (Abmole, M4839) 為MTT 法的替代方法,是一種基於WST(水溶性四唑鹽,化學名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應用於細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。

作者在研究過程中,證實了異丙酚可抑制Glu誘導的PC12細胞凋亡。PC12細胞用異丙酚和/或glu處理24小時。之後,分別採用CCK-8法檢測細胞活力、流式細胞術和western blot分別檢測凋亡比值和凋亡蛋白(Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3、cleaved-caspase -9)的表。CCK-8即購自Abmole,在研究中發揮了重要的作用。

鳴謝:Yu S , Xin W , Jiang Q , et al. Propofol exerts neuroprotective functions by downregulating microRNA19a in glutamic acidinduced PC12 cells[J]. BioFactors, 2020.

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