【臨床執業】考點解讀:蛋白質的等電點、沉澱和變性
2021-01-13 人衛醫考在酸性溶液中，蛋白質解離成陽離子；在鹼性溶液中，蛋白質解離成陰離子｡當蛋白質溶液處於某一pH時，蛋白質解離成正、負離子的趨勢相等，即成為兼性離子，淨電荷為零，此時溶液的pH稱為蛋白質的等電點。
1. 定義：蛋白質分子凝聚從溶液中析出的現象稱為沉澱。
2. 主要方法：鹽析、重金屬離子沉澱、生物鹼試劑沉澱、有機溶劑沉澱等。
3. 常用中性鹽：硫酸銨、硫酸鈉和氯化鈉等。
4. 應用：鹽析沉澱的蛋白質通常不發生變性，故此法常用於天然蛋白質的分離。
3. 變性的因素：高溫、高壓、紫外線、X射線照射、超聲波、劇烈震蕩及攪拌等物理因素；強酸、強鹼、重金屬鹽、有機溶劑、高濃度尿素和十二烷基硫酸鈉等化學因素。4. 不可逆變性：蛋白質劇烈變性時其空間結構破壞嚴重，不能恢復。可逆變性，某些溫和蛋白質變性，如持續時間較短，除去變性因素仍可恢復其活性。
5. 蛋白質變性理論的臨床應用：消毒滅菌、低溫保存生物活性蛋白質等。
相關焦點
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蛋白質的變性與沉澱是兩個不同的概念
其實這是兩個完全不同的概念，變性的蛋白質並不一定發生沉澱，發生了沉澱的蛋白也未必一定是變性蛋白。從生化的概念上來說，天然蛋白因受物理或化學因素影響，高級結構遭到破壞，致使其理化性質和生物功能發生改變，但並不導致一級結構的改變，這種現象稱為變性。也就是說，變性是以蛋白質的構象來定義的。 -
細胞膜蛋白質提取方法 蛋白質沉澱法
1.熱變性及酸鹼變性沉澱法 用於選擇性的除去某些不耐熱及在一定PH值下易變性的雜蛋白。 2.有機溶劑沉澱法 多用於生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化，有時也用於蛋白質沉澱。 3.等電點沉澱法 用於胺基酸、蛋白質及其它兩性物質的沉澱。但此法單獨應用較少，多與其它方法結合使用。 4.非離子多聚體沉澱法 用於分離生物大分子。 -
漫談蛋白質的變性
天然蛋白因受物理或化學因素影響，高級結構遭到破壞，致使其理化性質和生物功能發生改變，但並不導致一級結構的改變，這種現象稱為蛋白質的變性。二硫鍵的改變引起的失活可看作變性。 能使蛋白質變性的因素很多，如強酸、強鹼、重金屬鹽、尿素、胍、去汙劑、三氯乙酸、有機溶劑、高溫、射線、超聲波、劇烈振蕩或攪拌等。 -
蛋白質的鹽溶、鹽析和變性
在蛋白質溶液中為何加少量的硫酸銨能促進蛋白質的溶解，而加高濃度的硫酸銨卻會使蛋白質析出呢？而硫酸銅溶液同樣是鹽溶液卻使析出的蛋白質不像前者那樣可溶於水呢？為此我們必須明確鹽溶、鹽析和變性的概念.當高濃度的中性鹽加入到蛋白質溶液中，對蛋白質主要產生兩種影響：1.破壞了水化層：在高濃度的中性鹽溶液中，由於蛋白質和鹽離子對溶液中水分子都有吸引力，產生與水化合現象，但它們之間有競爭作用，當大量中性鹽加入時，使得鹽解離產生的離子爭奪了溶液中大部分自由水，從而破壞蛋白質的水化作用，引起蛋白質溶解度降低，故從溶液中沉澱出來. -
第四節 蛋白質的理化性質
蛋白質溶液的pH大於等電點，該蛋白質顆粒帶負電荷，反之則帶正電荷。 各種蛋白質分子由於所含的鹼性胺基酸和酸性胺基酸的數目不同，因而有各自的等電點。 凡鹼性胺基酸含量較多的蛋白質，等電點就偏鹼性，如組蛋白、精蛋白等。 -
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蛋白質的變性
在物理和化學因素作用下，蛋白質分子特定的空間構象被破壞，從有序的空間結構變成無序的空間結構，進而導致蛋白質理化性質的改變和生物活性的喪失，稱為蛋白質的變性 -
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考點二、血紅蛋白（了解）血紅蛋白分子是有核紅細胞、網織紅細胞內形成的一種含色素蛋白質。色素部分為亞鐵血紅素，蛋白質部分為珠蛋白。亞鐵血紅素由原卟啉、鐵組成。血紅蛋白的合成受紅細胞生成素和雄激素的調節。淚滴形RBC：骨髓纖維化和正常人。考點三、紅細胞內結構異常（掌握）1．嗜鹼性點彩紅細胞：細胞胞質內出現形態不一，大小不等的藍色顆粒（殘存變性嗜鹼性RNA），常用於鉛中毒的篩查指標。 -
蛋白質的分離純化（二）
從原料中抽提得到的蛋白質溶液一般蛋白質含量較低，並含有多種雜質。對抽提液進行初步提取，也稱粗提或粗分級，主要目的是除去糖、脂類、核酸及大部分雜蛋白，並將蛋白濃縮。這一步的操作一般應該儘量簡單快速，並且適於處理大量樣品，所以以沉澱法為主，包括簡單沉澱、分級沉澱等。 -
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化學有機物之蛋白質的分類與結構
第三節 蛋白質的性質一、 兩性解離和等電點組成蛋白質的胺基酸分子中含有氨基和羧基，它既能像酸一樣解離，也能像鹼一樣解離，因此它具有兩性性質，同樣由胺基酸組成的蛋白質也具有兩性性質，當蛋白質在某一pH時，其解離為陰離子和陽離子的趨勢相等，蛋白質所帶淨電荷為零，此時的這一pH稱為該蛋白質的等電點 -
蛋白質性質在烹飪中的應用
(二)蛋白質的變性在烹飪中的應用在烹飪中幾乎所有的蛋白質在加熱時發生變性，接著開始凝固。一般蛋白質的熱變性在45"C- 50"C就能初步察覺， 55"C- 60"C時，進行的比較快，並開始凝結。我們將蛋白質在受熱發生凝結時的溫度叫做該蛋白質的凝固溫度。生雞蛋煮熟的過程就是先變性後凝固的過程。 -
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