如何快速高效的配製PBS緩衝液

2021-02-20 實驗小師兄

PBS是磷酸鹽緩衝液（PhosphateBuffer Saline），是生物學實驗室最常用的緩衝液之一。其主要成分包括：氯化鈉（NaCl）、氯化鉀（KCl）、磷酸氫二鈉（Na2HPO4）和磷酸二氫鉀（KH2PO4）。如何快速且高效的配製PBS緩衝液呢？首先我們需要配製10X的PBS母液，然後再對其母液進行1:10稀釋即可獲得PBS緩衝液。這樣做有兩個巨大的優勢：1，可以一勞永逸；2，減小誤差。下面為大家進行介紹。

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NaCl  58.44 g/mol（終濃度136mM）

KCl   74.55 g/mol（終濃度2.6mM）

Na2HPO4 141.96 g/mol（終濃度10mM）

KH2PO4  136.09 g/mol（終濃度2mM）

燒杯兩個、微波爐或水浴鍋、量筒、磁力攪拌器及配套的轉子

1. 清洗乾淨所需燒杯、轉子和量筒，向一個燒杯裝少量去離子水（約100ml）並放入一個轉子後放在稱量天平旁備用；向另一個燒杯裝約800ml去離子水並在微波爐或者水浴鍋（65°以上均可）中加熱。

2. 按照如下表格稱量試劑並倒入天平旁的燒杯中。

NaCl                       8.0 g

KCl                          0.2 g

Na2HPO4               1.42 g

KH2PO4                  0.27 g

**注意：由於實驗室所購買的Na2HPO4常常帶有二水、七水或者十二水，與之對應的重量分別為1.78g、2.68g、3.58g。

 3. 向燒杯中加入預熱的去離子水，燒杯放置在磁力攪拌器上攪拌溶解。用量筒定容到1L，保存備用。

 4. 取100ml 10X的PBS母液，加入900ml去離子水即可獲得pH=7.4的PBS緩衝液（無需用pH計校準PH值）。

>加入去離子水可以更快速的溶解鹽離子，而對PBS無影響。

>PBS可以高溫高壓滅菌後長期保存，也可以過濾除菌後長期保存。

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