袁靜萍教授:PD-L1檢測的質控相關問題

2020-11-30 騰訊網

引言

隨著免疫治療藥物在國內的適應症越來越廣泛，以及PD-L1抗體DAKO 22C3和DAKO 28-8在國內的獲批，PD-L1免疫組化規劃檢測在病理一線工作中尤為重要，但不同藥物所使用的PD-L1抗體的克隆號和檢測平臺不同，從而可導致PD-L1免疫組化的質控受到影響。為此，91360特邀武漢大學人民醫院袁靜萍教授就PD-L1的免疫組化質控問題進行採訪。

1 目前PD-L1免疫組化的檢測中主要存在的問題有哪些？

袁靜萍教授：由於目前批准的免疫檢查點抑制劑採用的PD-L1伴隨診斷或補充診斷是採用不同克隆號的PD-L1抗體和檢測平臺進行的，這樣就導致了這些檢測結果的一致性問題。雖然從Blueprint計劃1期和2期結果顯示Dako公司的28-8和22C3、羅氏公司的SP263和SP142具有較好的一致性，但是，國內目前的現狀是同時擁有Dako和羅氏公司的免疫組化檢測平臺還較少，也有很多單位還是手工操作，這樣的檢測結果是否可靠還未得到驗證和認識。在PD-L1免疫組化結果的判讀上，大多數單位病理醫生雖然通過各種途徑了解和熟悉，但並未能進行規範化培訓，針對不同檢測平臺、不同克隆號的抗體甚至不同瘤種，其判讀標準都存在差異，從而也會導致判讀結果的主觀性。目前，大多數醫院病理科的抗體處于贈送試用階段，也會出現抗體供應不及時，影響病人檢測的情況，另外，抗體正式獲批後的定價，該項檢測費用的高低也將成為病人能否檢測的關鍵因素之一。最後，中國尚未出臺PD-L1規範化檢測的相關共識，這也使各單位沒有統一的標準參考。

2 質控是PD-L1檢測的重要因素，哪些是質控中的重要內容？

袁靜萍教授：的確，我們注意到了NCCN非小細胞肺癌指南對PD-L1檢測的推薦，突出了PD-L1檢測對免疫治療的指導價值，這也對病理醫生在PD-L1免疫組化的檢測過程提出了更高的要求，即病理醫生需要向臨床醫生提供更加準確的PD-L1免疫組化檢測結果。很好的質控對於檢測結果具有非常重要的作用。我認為，質控無大小，任何一個環節質控沒有做好，都可能影響PD-L1的免疫組化檢測結果。具體來說，從標本開始固定就需要標準的4%的中性福馬林液固定，固定時間應為12-24小時，固定液應為組織樣本的5-10倍，組織處理過程的浸蠟溫度應控制在60℃或以下，切片厚度應為4~5μm厚，58±2℃下烘乾1小時等。在染色過程中，應使用專門的抗原修復液，使用的抗體克隆號和檢測平臺需要對應等等，其中還有對照片的選擇，質控對照片是反應整個技術流程是否標準的非常重要的一環，常規是要求每個切片都要設置相應的對照片。當然，除了技術相關的質控，判讀標準的質控也非常重要。

3 對於PD-L1檢測，陽性和陰性對照如何選擇？

袁靜萍教授：目前各種文獻、指南均推薦使用扁桃體或胎盤組織作為PD-L1免疫組化檢測的陽性對照，我們也是根據這些指南推薦使用的。根據我們的經驗，胎盤組織PD-L1表達陽性強度要高於扁桃體，但表達強度基本一致；而扁桃體表達呈現出強弱不等的表達。在扁桃體中，大多數生發中心巨噬細胞呈現弱到中等強度的點狀胞膜染色，大多數上皮隱窩細胞呈現中等到強的染色，而大多數淋巴細胞(外套層和生發中心B細胞)和淺表上皮細胞無染色，這種不同強度的表達方式有助於我們對腫瘤組織進行判讀。因此，我更傾向於採用扁桃體作為陽性對照組織。當然，每個單位和個人均可以根據自己的習慣採用適合的陽性對照組織，但原則上應採用上述2種組織，這樣檢測結果才能具有可比性。同時，我們還需要設置病人自身標本的陰性對照及常規未有抗體標記的扁桃體或胎盤組織的陰性對照，以排除自身因素產生的幹擾。

4 在PD-L1檢測結果判讀的過程中，需要進行質量控制的因素有哪些？

袁靜萍教授：PD-L1免疫組化檢測結果的判讀中，我認為以下幾個方面需要進行質量控制的。一是檢測組織中的腫瘤細胞數量。根據文獻或指南，對於PD-L1檢測至少需要計數100個活的腫瘤細胞，這樣檢測結果才具有可靠性。然而，並不是所有樣本均符合這個要求，所以，當腫瘤細胞數量不足100時，應該在檢測報告中明確註明樣本中的腫瘤細胞數量，這樣才能有助於臨床醫生的治療決策。二是確定什麼才是陽性表達。PD-L1的陽性表達必須是細胞膜陽性，而不管其強弱程度。如果出現細胞質陽性或模糊不清的陽性時，均不能判讀為PD-L1表達陽性。三是需要避免誤判。腫瘤組織內會有一些巨噬細胞，這種情況在肺癌內特別明顯。肺泡腔內的巨噬細胞會表達PD-L1，此時不應將其誤認為腫瘤細胞陽性而判讀為PD-L1陽性。還有，壞死周圍及切片周圍的腫瘤組織也可有PD-L1表達，這個可能為壞死組織內的抗原彌散或邊緣效應而導致的假象，應避免判讀為陽性。肺是開放性器官，經常會有一些碳塵顆粒等沉積，會誤認為是PD-L1表達，也需要進行鑑別。最後，組織內的擠壓也會導致PD-L1表達，也不能將其判讀為陽性。

5 PD-L1免疫組化檢測的質控中，您認為還有哪些方面需要加強？

袁靜萍教授：質控是一項重要的工程，質控工作永遠在路上。我個人認為，PD-L1的免疫組化質控不僅僅是個人或單位的事情，各級學術組織尤其是各省市的病理質控中心需要承擔起組織和實施的工作。可以不定期地舉辦PD-L1免疫組化檢測和判斷培訓班，通過培訓，提高各個單位病理科的PD-L1的檢測和判讀水平。對於每個病理科，如有條件，應由專門的病理技術員和病理醫生進行PD-L1的檢測工作，這樣可確保檢測條件和判讀的一致性。還有，與臨床醫生積極配合和聯繫，以便不斷提高PD-L1判讀準確性。

NP/IO/4601/03/27/20-03/25/22

相關焦點

  • 武春燕教授:PD-L1檢測那些事兒
    ，請武教授為大家揭秘PD-L1檢測的那些事兒。從事臨床病理診斷工作20餘年，擅長肺及縱膈相關疾病的病理診斷，尤其在細胞病理、肉芽腫性疾病及肺癌鑑別診斷具有很深的造詣。承擔同濟大學醫學院病理學教學及進修醫生的帶教工作。擔任中華醫學會上海分會病理專科委員、中國醫師協會病理醫師分會委員 、PQCC分子病理組委員 、中國腫瘤驅動基因分析聯盟委員 、國家衛生和計劃生育委員會病理質控評價中心分子病理組委員。
  • 聯合PD-1/PD-L1療法 哪些靶點受到關注?
    對臨床試驗特徵的進一步分析發現，大於80%的臨床試驗在檢測由抗PD-1/PD-L1抗體與其它療法構成的組合療法。在所有的臨床開發階段，檢驗組合療法的臨床試驗增長速度都超過抗PD-1/PD-L1單藥療法。
  • 甲基化晶片數據的一些質控指標
    前面我們介紹了一些背景知識，主要是理解什麼是DNA甲基化，為什麼要檢測它，以及晶片和測序兩個方向的DNA甲基化檢測技術。具體介紹在：甲基化的一些基礎知識，也了解了甲基化晶片的一般分析流程 。然後下載了自己感興趣的項目的每個樣本的idat原始文件，也可以簡單通過minfi包或者champ處理它們拿到一個對象。
  • PD-L1到底該如何檢測?
    但當這一治療落實到臨床實踐中時，就提出了很多的問題。今日我們就近期很多患者提到的PD-L1的檢測進行簡單的解析。在今年NCCN指南中明確提出對於無明確驅動基因突變的初診的晚期NSCLC肺癌患者可以進行PD-L1的檢測，如果PD-L1表達≥50%，初始治療可以選擇PD-1單抗Keytruda用藥。基於其較化療優越的臨床生存優勢及較少的不良反應。
  • 如何理解多參數水質檢測儀檢測過程中空白樣、質控樣、標準樣?
    多參數水質檢測儀在使用多參數水質檢測儀進行水質檢測分析時，經常會遇到空白樣、質控樣、標準樣等相關專業術語或概念，那麼該如何對其理解呢？空白樣是指進行空白試驗的樣本，對水樣進行檢測時，要去除待檢測的分析指標，然後進行其它條件完全相同的試驗，即空白試驗，其目的是為了校正有關外界因素對測定分析結果的影響。空白樣品可以檢驗整個樣品處理過程是否受到汙染，試劑有無需要檢測的成分，有多少含量，檢測過程中儀器的檢出限以及基體幹擾的扣除。
  • 質控的歷史與基礎知識
    本系列內容不定期與大家分享檢驗質控的相關內容，和檢驗人共同學習質控知識！本期內容來源於質控學苑，由北京協和醫院檢驗科程歆琦教授授權發布。 ——檢驗君 一提到實驗室質控，大家腦海裡必然會浮現出經典的L-J圖。
  • 膀胱癌PD-L1千人免費檢測項目在廣州啟動
    昨日，由中國膀胱癌聯盟、中國抗癌協會聯合主辦、阿斯利康中國和拓普基因支持的中國膀胱癌PD-L1千人免費檢測項目在廣州啟動。作為晚期膀胱癌患者關愛項目，PD-L1千人免費檢測項目將由全國約50家醫院的泌尿外科、腫瘤科、病理科醫師，為前1000名患者申請免費檢測。PD-L1檢測結果可為晚期膀胱癌患者用藥選擇提供參考，也是腫瘤免疫治療預後的重要預測指標。
  • PD-L1的檢測是免疫治療的不二法門嗎?
    而如何篩選出治療受益人群還是一個亟待解決的問題。PD-L1檢測逐漸得到較多應用，但它的效果如何，是否是免疫治療唯一或者最好的標誌物，是否還有其他標誌物可供選擇，怎樣才能夠更好的富集出免疫治療受益人群，都受到臨床醫生的關注。為此，91360智慧病理網邀請重慶醫科大學臨床病理診斷中心曹友德教授就「PD-L1檢測是免疫治療的不二法門嗎？」做一闡述。
  • 核醫學影像檢測PD-1/PD-L1表達的研究進展
    PD-1/PD-L1免疫阻斷療法的預後與相關生物標記物的體內表達有關，其精準檢測可以用來篩選最有可能對PD-1/PD-L1免疫治療作出反應的患者，在早期將反應性與難治性腫瘤區分。前期研究表明，核醫學分子影像學技術可以從整體上直觀且無創性地監測相關免疫檢查點的表達，即檢測和量化患者的PD-1/PD-L1表達水平以提供更精確、實時、全面的信息，進而來篩選適合PD-1/PD-L1免疫治療的患者及對療效進行預估。本文將對PD-1/PD-L1免疫阻斷療法做簡單介紹，並重點對已報導的具有轉化和指導價值的相關核醫學分子影像學基礎研究進行總結歸納。
  • PD-L1檢測裡的門道:不同的檢測標準,最終結果可能完全不同!
    但你想過檢測標準之間可能存在的巨大差異麼？選對正確的檢測機構（試劑盒），有時比正確的治療決策更重要！ PD-1/PD-L1抗體單獨使用，在絕大多數晚期實體瘤中，只有10-30%左右的有效率；言外之意，如果單獨使用免疫治療，一大半病友是無法獲得令人滿意的療效的。
  • [深度]爭議和挑戰:論PD-L1檢測對NSCLC的價值
    但是兩者在應用範圍上有一點差異：Nivolumab在臨床使用中不需要檢測PD-L1表達水平，但pembrolizumab只能用於PD-L1陽性的患者。在這樣的規定之下，PD-L1檢測在篩選合適患者中的作用引起了越來越多的爭論。相關研究縱覽1.
  • 只早上做一次質控行嗎?
    一共複查了十五個低Na的標本，換了臺儀器（非流水線的急診儀器）檢測，結果全部在參考區間內。說明流水線上的某生化儀Na的檢測出了問題；2. 檢查這批低Na標本檢測出於哪臺儀器，發現均出於流水線第一臺生化儀；3.
  • 數據質控「小法寶」,同款Tips你值得擁有~
    「我的樣本送質譜檢測平臺測完了，數據也拿到了，寫文章、發SCI指日可待！」小B：唉！「我上周就拿到了，但是我對數據有點疑惑，不確定是樣本問題還是檢測問題，感覺跟我預期有點出入。」小鹿：「別慌，小鹿有嚴格完善的質量控制體系來幫您！」以上場景是否時常發生在大家的科研工作中呀？
  • 微生物實驗室質控和抗生素管理:臺灣醫院經驗
    演講者：臺灣大學醫學部附屬醫院檢驗醫學科臨床微生物科 薛博仁教授薛教授介紹了
  • 我院病理科獲得國家病理質控中心乳腺癌HER2免疫組化室間質控合格...
    近日，我院病理科參加了由國家病理質控中心和中華醫學會病理分會，聯合組織的2020年乳腺癌HER2（Human Epidermal Growth Factor Receptor 2，人表皮生長因子受體-2）免疫組化室間質控評價（PQCC-IHC-Her2-BC-R14），並以優異的成績通過檢測，獲得合格證書，這也是近年來我院病理科第二次獲此殊榮
  • 推動診療均質化 河南省乳腺癌診療質控建設啟動會召開
    △河南省腫瘤質控中心乳腺癌專家委員會成立儀式暨乳腺癌診療質控建設啟動會啟動儀式環節合影中國醫學科學院腫瘤醫院內科主任醫師、國家腫瘤質控中心乳腺癌專家委員會主任委員徐兵河教授表示：「乳腺癌作為常見的惡性腫瘤，嚴重威脅著我國女性的健康。
  • 福祿克提供滿足行業標準的CT質控解決方案
    福祿克提供滿足行業標準的CT質控解決方案
  • 張玉順蔣世良朱鮮陽教授領銜推行業「標準」 《卵圓孔未閉相關卒中...
    過去幾年中國臨床與學術界加快對「卵圓孔未閉（PFO）相關卒中預防」研究步伐，2015年 「卵圓孔未閉處理策略中國專家建議」發布；2017年 「卵圓孔未閉預防性封堵術中國專家共識」發布 ；2020年由全國先心病介入專業質控中心、國家心血管中心北京阜外醫院牽頭，聯合了北京天壇醫院、西安交通大學第一附屬醫院、廣東省人民醫院、武漢亞洲心臟病醫院、北部戰區總醫院等發起單位，共同成立「PFO診療規範化培訓學院」
  • 蛋白藥物分離純化與質控技術研修班通知(附日程)
    近年來中國生物製藥發展迅猛，新藥研發活躍，並逐漸向規模化的方向發展，但其發展過程中也遇到種種技術問題，特別是在蛋白純化和質控方面。　　純化技術提升的同時，也隨之對質控技術提出新的挑戰。2015年版《中國藥典》實施後，生物藥品檢驗控制體系與國際通行標準全面接軌，對生物醫藥研發機構與企業的QC 實驗室規劃建設、質量管理、分析檢測技術能力與檢驗控制理念等均提出了新的要求。
  • 雲南省啟動乳腺癌質控工作 推動診療均質化
    雲南網訊（記者 陳鑫龍）近日，記者從2020年乳腺癌診治進展論壇上了解到，為進一步加強雲南省乳腺癌診療質量與安全，提高省內乳腺癌患者生存率，雲南省正式啟動乳腺癌規範化診療控制管理相關工作，推動乳腺癌診療均質化，保障省內乳腺癌患者獲得更加規範、有效的診療。