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作者：解螺旋.燕子 解螺旋原創
轉載請註明來源：解螺旋，醫生科研助手
師弟：師姐，快來幫我看一下，我的細胞好像汙染了，都長毛了，怎麼辦？
師姐：多久沒換液了？ 培養箱裡還有其他細胞汙染嗎？還有顯微鏡下這麼黑呼呼的，是好像嗎？
師弟： ~~~師姐~~~
師姐：趕緊把這96孔板拿出去扔了，爬片了這麼多天，就可以上雷射共聚焦拍了，這節骨眼上！！
師弟：師姐，那你是怎麼做的？我的操作到底哪裡出問題了？
師姐：我不過是「死操作」，再加上一點小聰明罷了。
細胞培養中最常見汙染的是細菌、真菌和支原體汙染。判斷細胞是否汙染的一種簡單方法是，如果是細菌汙染，培養基應該很快變渾濁（紅的培養基變黃變渾濁）;如果是真菌感染，初期感染可以在低倍鏡下可以看到黑點，特別是成團的黑點，如果無法確定，就換高倍鏡，如果是死細胞，在高倍鏡下就可以分辨，而真菌在高倍鏡下仍然是小黑點。如果是支原體汙染時，外觀沒有明顯的變化，但會使細胞生長速率減慢難以察覺。細胞一旦汙染，大多數較難處理（只有扔）。
看來師弟的細胞被汙染了是板上釘釘了的，那到底哪裡出了問題？下次改怎麼避免。
汙染一： 培養箱太久沒清潔
細胞汙染了，不要直接扔了培養皿就不管了；首先你還得看看這個恆溫培養箱裡其他培養皿或孔板裡的細胞是否汙染，如果有而且好幾個板子都有類似的汙染塊，那很可能是培養箱中的水或者空氣汙染了，得給培養箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱裡的水，不僅沒了得加還得記得十天半個月的就用酒精擦擦託盤。
汙染二：超淨臺和桌面，東西太多太亂
超淨臺不是儲物箱，什麼培養皿、各種規格的板子、槍頭就不要堆在超淨臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛生死角。細胞房其他的桌面，同樣切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標籤紙、牛皮紙買來後全部堆在細胞房！一不小心「飄」進你的細胞培養板裡，細胞就會死給你看！
汙染三：細胞房人多口雜，難管理
試驗室人多好啊，大家可以一起愉快的玩耍，而在細胞房這種衛生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴鞋套，猶入無人之境，來去自由；超淨臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，殊不知你噴口氣，裡面就有很多細菌呢！
汙染四：避免違規操作
1. 為節省時間，有人已經用超淨臺四個多小時，不開紫外滅菌30min,酒精擦拭後直接開始試驗。
2. 器材或者溶液很久沒有，未檢測是否汙染直接使用；離心管多次使用，搶頭為圖方便交叉使用。
3. 超淨臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗（和沒點也沒差！）
4. 不帶手套，徒手操作。雖然你用洗手液洗了好幾次，還直接往手上噴75%乙醇，也真是膽大，長久以往手上的皮膚肯定會被燒傷。
細胞培養間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，並定期消毒。專用物品只在培養間內使用，不得帶出細胞房。無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞。必要物品可暫時放置，其他實驗用品用完即應移出，以利於氣流的通暢。培養細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等需121°C高壓滅菌20分鐘後37％烤乾備用，一些玻璃器皿如細胞培養瓶等須先泡酸、洗淨、晾乾後再高壓滅菌。
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