檢測細胞培養及生物製品的支原體汙染選用什麼呢

2020-09-18 INRINE

支原體檢測試劑盒Venor®GeM OneStep

採用常規PCR方法，並包含PCR需要的所有試劑。其中引物和dNTP、DNA聚合酶、內控對照都包含在PCR預混液（Mix）乾粉中。重懸緩衝液復溶Mix乾粉，分裝到PCR管中，分別加入細胞上清（陰性對照）、復溶的陽性對照DNA和待測樣品（細胞上清或提取的樣本DNA），進行PCR反應。

用途：檢測細胞培養及生物製品的支原體汙染

建議適用範圍

細胞培養和其衍生的生物製劑領域的科研和工業都適用。

PCR類型

常規PCR；

試劑盒組成

  • Mix乾粉（引物、dNTP、 熱啟動taq酶，內控對照 ）
  • 重懸緩衝液
  • 陽性對照DNA
  • Tris/EDTA緩衝液

特點

  • 廣譜（包含常規26種支原體）
  • 靈敏度高
  • 特異性好
  • 操作簡單
  • 便捷（整個操作不到3小時）

配套儀器和耗材

瓊脂糖凝膠電泳系統、DNA染料、PCR儀、PCR管、移液器、離心管等

規格

貨號：11-8025 規格：25次

貨號：11-8050 規格：50次

貨號：11-8100 規格：100次

貨號：11-8250 規格：250次

結果判斷

內控對照條帶在191bp，表明PCR過程正常。

如果待測樣本在270bp位置出現條帶，而陰性對照沒有條帶，表明存在支原體汙染。

儲存

2-8℃；乾粉復溶後儲存於-18℃。

若有意向可聯繫中國總代理北京締一生物

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  • 細胞培養：關於支原體汙染的危害
    支原體汙染普遍存在，據美國數據統計，細胞發生支原體汙染的機率在70%以上。同時，由於支原體直徑很小，僅在180nm~350nm之間，只有通過電鏡才能看到，不易被實驗者肉眼發覺，支原體汙染逐漸成為一個普遍存在的問題。本文締一生物為您分析細胞培養：關於支原體汙染的危害。
  • 細胞培養中的支原體汙染問題
    支原體無細胞壁形態呈高度多形性．可為圓形、絲狀或梨形。支原體形態多變，在光境下不易看清部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構．其中央有電幹密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在於細胞表面和細胞之間。橫斷面與細胞微絨毛相似，但微絨毛電子密度比支原體小，且中央無顆粒群或中央束。
  • 細胞培養中的支原體汙染的預防及處理
    國外調查證明，大約有二十多種支原體能汙染細胞，有的細胞株可以同時汙染兩種以上的支原體。 支原體汙染的來源包括工作環境的汙染、操作者本身的汙染（某些支原體在人體是正常菌群）、培養基的汙染、被汙染細胞造成的交叉汙染、實驗器材的汙染、製備細胞的原始組織或器官的汙染，等等。
  • 細胞培養中支原體檢測的重要性
    1、支原體存在於我們周圍，他可能就如塵埃一樣存在於我們的環境中 2、可透過一般的濾膜，所以不要寄希望於過濾可以清楚支原體汙染的液體 支原體對培養細胞的汙染發生率高，據估計平均發生率在60%左右。同時又非常隱秘，早期不容易被發現，除非用特異性和靈敏度都非常高的檢測試劑盒。
  • 細胞總培養不好，你考慮過是支原體在作亂嗎
    據報導，細胞培養中發生支原體汙染的機率較高，會達到70%左右，常規抗生素的使用對支原體幾乎無效。那麼，支原體汙染，對細胞培養有什麼危害呢？重新復甦細胞，注意選用未被汙染的細胞株、血清和培養基，並規範操作。方法二：對於珍貴的，樣品不可再得的細胞，或價格昂貴的種子細胞，不但無法丟棄，而且作為種子細胞，還需要徹底根除支原體汙染。
  • 細胞培養支原體汙染的判斷和處理方法
    ，光鏡下難以看清它的形態結構，並對青黴素有抗藥性，是細胞培養界的隱性殺手。主要來源是血清，支原體汙染不能用肉眼或光學顯微鏡檢查細胞觀察出來，帶有一定的隱蔽性，易被人們忽視。當細胞被支原體汙染後，在光鏡下常可見到細胞核及胞漿內出現大小不等的顆粒或空泡，細胞營養液可能毫無變化，短期內細胞沒有明顯的病理變化，也可以因為傳代或換液而緩解。只有當汙染嚴重時才影響細胞增殖，使細胞脫落。支原體可以與宿主細胞形成一個共生關係，使汙染不斷擴大。
  • 細胞被支原體汙染的危害有多大
    在細胞培養過程中，支原體感染發生率達到63%，因而細胞培養過程中被支原體汙染是一個世界性的難題。當細胞（特別是傳代細胞）被支原體汙染後，細胞內的DNA、RNA及蛋白表達發生改變，而細胞的生長率一般並未發生顯著的影響，因而細胞被支原體汙染一般難以察覺。
  • 培養細胞汙染的檢測及排除
    凡混入細胞培養環境中對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應視為汙染細胞汙染不能完全被消除，但能減少其發生的頻率和後果的嚴重性細胞汙染的分類物理汙染化學汙染生物汙染（支原體汙染）控制汙染掌握良好的無菌操作技術建立細胞庫合理應用抗生素保持工作區清潔建立良好的規章制度檢測細胞汙染
  • 勿讓支原體成為培養細胞的殺手
    有時看到論文裡，會寫到在培養細胞時，一周檢測一次支原體，為什麼會出現這種情況呢？原來，支原體很容易成為培養細胞的殺手。支原體直徑約0.1-0.3µm，比細菌還小。它容易附著於細胞表面，與宿主細胞胞膜融合併交換成分。環境中很容易存在支原體，人體也容易攜帶支原體。
  • 同樣是細胞被支原體汙染，怎麼挑選支原體祛除劑
    養細胞時，除了支原體的檢測需要定期進行外，支原體的預防和祛除也是一個重要方面。它包括工作區域中的支原體的預防和祛除和培養箱水槽、水浴鍋中預防支原體的汙染。但一旦發生細胞培養時有支原體汙染，應如何挑選支原體祛除劑呢？這裡指的支原體祛除劑，是加入到細胞培養基中來發揮作用。德國MB有三種支原體祛除劑，都是加入到細胞培養基中使用。它包括：1.
  • 細胞培養的實驗室對支原體汙染預防有幾種預防
    支原體的汙染肉眼不易察覺，直到嚴重的階段才會出現培養基變色、細胞異常等情況。支原體可造成細胞代謝改變，基因表達譜發生變化，從而嚴重幹擾實驗進程。本文締一生物為您分析細胞培養的實驗室對支原體汙染預防有幾種預防。因此，在細胞培養過程中，定期監測是否存在支原體汙染，及時預防支原體汙染是每個科研人員的工作之一。
  • 細胞中支原體的汙染檢測有如下幾種方法
    支原體最早發現於1898年，1956年Robinson等首次從細胞培養物中分離出支原體，之後國內外關於支原體汙染細胞的報導屢見不鮮。它廣泛存在於自然界中，有100餘種。現在只要是做細胞培養並發表論文，國際期刊就要求一定要做支原體檢測。一般要一周測一次支原體。
  • 細胞培養汙染拯救及預防方法
    3、支原體汙染§支原體是介於細菌與病毒之間能獨立生活的最小微生物，最小直徑0.2μm，一般過濾除菌無法去除它，光鏡下難以看清它的形態結構。開始不易發現，能在偏鹼條件下生存，對青黴素有抗藥性。多吸附於細胞表面或散在於細胞之間。§培養細胞受支原體汙染後，部分敏感細胞可見細胞生長增殖變慢，部分細胞變圓，從瓶壁脫落。
  • 如何有效把支原體汙染趕出你的細胞?
    對於已耗費很多時間、大量擴增起來的細胞，或經過基因轉染、體外刺激等大量工作處理過的細胞，如果發現細胞被支原體汙染了，怎麼辦？本文締一生物為您分析如何有效把支原體汙染趕出你的細胞？ 由於前期工作量巨大，我們無法丟棄已有細胞。
  • Nature:大量的細胞研究被支原體汙染摧毀
    支原體汙染是細胞培養中普遍存在的一種臭名昭著的汙染源。支原體的存在會剝奪細胞的營養物質，改變某些基因的表達水平，從而對細胞生物學的研究產生深遠的影響。支原體是最小的可體外生長的微生物，直徑約為0.3～0.8um，它們可以通過濾菌器而無法被過濾除去。
  • 從以往PCR對支原體汙染的檢測報導看方法驗證的必要性
    國外已有不少藥廠將PCR或qPCR用於工業放行檢測中的支原體檢查。PCR的靈敏度、特異性、適用性和可靠性具有達到藥典標準的潛在可能。但需要按步驟和程序開展方法驗證。有作者指出，有些PCR法在反應條件及引物設計上，仍需不斷改良以提高其檢測效率。