小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現象的觀察

2020-12-05 騰訊網

【基本原理】

細胞的吞噬作用在單細胞動物是攝取營養物質的方式,在高等動物內的巨噬細胞、單核細胞和中性粒細胞等具有吞噬功能,是機體非特異性免疫功能的重要組成部分。巨噬細胞是由骨髓幹細胞分化生成,當病原微生物或其他異物侵入機體時,巨噬細胞由於具有趨化性,便向異物處聚集,巨噬細胞可將之內吞入胞質,形成吞噬泡,然後在胞內與溶酶體融合,將異物消化分解。吞噬泡的形成需要有微絲及其結合蛋白的幫助,如果用降解微絲的藥物細胞鬆弛素B 處理細胞,則可阻斷吞噬泡的形成;免疫抑制劑環磷醯胺(CYP)對巨噬細胞的吞噬作用也有影響。

巨噬細胞起源於骨髓,經血液進入組織中而成,分布於全身各處。當機體受到某些損傷因素時(如微生物或其它病原體或異物侵入),能招引巨噬細胞,同時巨噬細胞有趨化性,主動向病原體或異物遊走,在接觸到病原體或異物時,細胞膜凹陷伸出偽足包圍異物,並發生胞吞作用形成吞噬泡,繼而細胞質中的溶酶體與吞噬泡融合,消化分解異物。含臺盼藍的澱粉肉湯,可使腹腔中有較多的吞噬細胞,以供觀察吞噬活動。

【方法步驟】

1.實驗前二天,每天向小鼠腹腔注射6%澱粉肉湯(含臺盼蘭,起標記作用)1ml 以刺激腹腔產生較多的巨噬細胞(此步由教師在實驗前進行完畢)。

2.實驗時,每組取一隻上述處理的小鼠,腹腔注射1% 雞血懸液0.5~1ml,注射後輕揉小鼠腹部以使紅細胞懸液分散均勻。

3.20 分鐘後,用頸椎脫臼法處死小鼠,迅速剖開小鼠腹部,向腹腔部注射0.5~1ml 生理鹽水,用吸管輕輕使生理鹽水與腹腔液混勻。

4.用吸管抽取腹腔液,滴片,然後蓋上蓋玻片。5.鏡檢

【實驗結果】

在高倍鏡下可見有許多較大的圓形和形狀不規則的巨噬細胞,因未染色細胞核不易見到,其胞質中含有數量不等的蘭色圓形小顆粒(即吞入的含臺盼蘭的澱粉肉湯所形成);還可見少量黃色橢圓形有明顯細胞核的雞紅細胞,慢慢移動玻片標本,仔細觀察視野中的巨噬細胞表面,有的紅細胞已部分被吞入;有的巨噬細胞內已吞入了一個或多個紅細胞形成吞噬泡。

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