關於支原體核酸擴增法的方法驗證

為驗證支原體PCR/qPCR法的靈敏度，德國MB提供滅活支原體的靈敏度標準品，經過10CFU或100CFU嚴格標定，可用於支原體核酸擴增法的方法驗證。

一、產品特點：

1. 支原體株來自英國菌種保藏中心NCTC。

2. 傳代次數少，支原體無變異。

3. 產品為凍乾粉，保證其穩定性。

4. 分析證書（COA）提供該批次GU：CFU比值（支原體基因組/菌落數比值）。

5. 支原體已滅活，保障細胞實驗室安全。

二、操作步驟

步驟1. 離心，收集標準品凍乾粉至管底。

步驟2. 每個管中添加1ml你的樣品基質。

步驟3. 室溫孵育5分鐘。

步驟4. 渦旋振蕩10秒，再離心10秒。

步驟5. 繼續DNA抽提。推薦使用德國MB公司提供的支原體DNA提取試劑盒（英文名：Venor®GeM Sample Preparation Kit，貨號56-1010/-1050/-1200）。

步驟6. 抽提的DNA用於PCR/qPCR擴增。

我國《CAR-T細胞治療產品質量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》支原體檢查部分指出：

「選用商品化的檢測試劑，在使用前也需確認其最低檢出限不低藥典方法。在早期使用時，應與藥典方法平行進行，在獲得充分的比對數據後才有可能替代藥典方法。」

以往已有肺炎支原體和口腔支原體標準菌株，用於培養法的靈敏度檢查。但對於PCR/qPCR支原體核酸檢測法，國內尚沒有用於靈敏度驗證的支原體菌株標準品。德國MB公司長期專注支原體產品的開發和支原體的防控，具有二十多年的經驗，其所提供的10CFU和100CFU支原體靈敏度標準品被國際各大藥廠廣泛使用，很好地彌補了這一空白，使得核酸檢測法與培養法可以平行開展和比較結果，有助於對核酸檢測法進行方法驗證，為廣大藥廠帶來了方便。

綜上所述，您是不是已經對關於支原體核酸擴增法的方法驗證，有所了解。如果還有其他疑問，請諮詢締一生物資深專家。