問問:微衛星不穩定

2021-01-19 飯範而生

多重螢光 PCR- 毛細管電泳法,該方法是檢測MSI 狀態是國際公認的金標準,NCCN、ASCO 等國際知名機構聯合推薦。


用患者的腫瘤組織樣本,使用該方法對檢測位點進行擴增,再通過毛細管電泳對擴增產物進行檢測,最後利用專業軟體對兩種組織來源檢測結果進行對比分析,能準確為患者 MSI 狀態進行分型。 


MSI 檢測位點: NR-21 XM_033393 (A)21 92-113 BAT-26 U41210 (A)26 160-185 BAT-25 L04143 (A)25 105-125 NR-24 X60152 (A)24 119-139 MONO-27 AC007684 (A)27 155-177 五核苷酸重複標誌物 Penta C AL138752 (AAAAG)3-15 190-250 等


實體瘤用藥指導:正常對照樣本 + 腫瘤組織樣本。 


①先確定特定染色體上特定微衛星位點標記,並根據其序列合成特異性引物。

②收集腫瘤組織及相應正常組織標本,用酚、氯仿抽提,乙醇沉澱,提取基因組DNA;

③PCR擴增;

④擴增產物的檢測。常用凝膠電泳,澳化乙錠染色後在紫外燈下觀查,或放射自顯影及銀染等方法觀察;

⑤判斷結果。


通過「微衛星不穩定」檢測,可以評價DNA錯配修復系統功能,分為:

① 微衛星高度不穩定型(MSI-H);

② 微衛星低度不穩定型(MSI-L);

③ 微衛星穩定型(MSS);

④ 達不到檢測標準(MSI-U)。

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    微衛星狀態可以分為:微衛星穩定(MSS)高度微衛星不穩定(MSI-H)中度微衛星不穩定(MSI-M)低度微衛星不穩定(MSI-L)。(2)錯配修復(MMR)與MSI 小結:通過詳細講解了微衛星不穩定、錯配修復等相關知識,讓我們了解到微衛星不穩定在臨床中與某些腫瘤發生及治療密切相關,指導每一位醫務人員在面對結直腸癌患者時應考慮檢測哪些指標?選擇何種方式為最佳治療?
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    微衛星不穩定(MSI)在結直腸癌、胃癌、子宮內膜癌等多個實體瘤中都是非常重要的分子生物標誌物,並且具有多個臨床意義。☟☟☟微衛星不穩定(MSI)是腫瘤中常見的第 5 種突變類型。與正常組織相比,腫瘤組織中由微衛星重複單元的插入或缺失所導致的微衛星長度的改變,被稱之為微衛星不穩定。在腫瘤基因檢測中,點突變、插入/缺失、融合、擴增是相對簡單的 4 種突變類型,而 MSI 是更加複雜的突變類型。
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    微衛星不穩定(microsatellite instability,MSI)是指由於錯配修復(mismatch repair,MMR)蛋白缺失(deficient MMR,dMMR)導致微衛星序列(通常由1-6個核苷酸為單位的串聯重複DNA序列)複製錯誤不能被修復,當錯誤累積到一定程度即形成微衛星高度不穩定(microsatellite instability-high,MSI-H)
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    微衛星,又被稱作短串聯重複序列(STR),重複單元一般為 1~6 個核苷酸構成。若腫瘤細胞中微衛星的重複單元數目較正常細胞發生了變化,則為微衛星不穩定(MSI)。
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    微衛星,也稱為短串聯重複序列(STR),是單位長度在1至6個鹼基對之間的短重複核苷酸序列,廣泛存在於真核生物的基因組中。微衛星不穩定性(MSI)表示微衛星基因座中的核苷酸插入或缺失。DNA複製過程中通常會發生微衛星區域的變化。
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    整個基因組有超過 100000 個被叫作「微衛星」的短串聯重複序列區域,複製過程中易於滑動出現錯誤,因此非常依賴於 MMR 系統修復。上面 4 個蛋白出現異常時,引起 MMR 缺陷(deficient MMR, dMMR),不能發現和修改微衛星複製錯誤而造成瀰漫的微衛星不穩定(microsatellite instability, MSI)。雖然大部分微衛星位於非編碼區,但是錯置的突變會導致移碼突變,引起腫瘤相關基因出現異常,進而誘導癌症發生。
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    主要從事胃癌、腸癌等惡性腫瘤的化療、靶向治療、免疫治療和研究 結直腸癌作為全球發生率排名第二,死亡率排名第三的惡性腫瘤,而且腫瘤的異質性很強,可謂是癌症家族中的「豪門」了,近些年,它跟化療、放療、靶向治療的糾葛已經不吸引大家眼球了,免疫治療後來居上,特別是「微衛星不穩定」的介入,這其中的愛恨情仇還是掀起了一層層的波浪啊,想知道其中的緣由,請聽我細細道來-------一、微衛星不穩定的家族大起底
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