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科研北鬥:你的protocol匯總+試劑嚮導
-引物設計(以Claudin-1為例)-
一、IDT法
提示:在正式設計引物前,我們需要進入NCBI,找到基因的CDS核心序列
1) 打開IDT(Integrated DNA Technologies)官網,將CDS序列粘貼至如圖位置,點擊design assay
2) 跳轉頁面後勾選Exons
3) 下拉頁面點擊 design assays,稍等一會就會出現推薦的引物 (如圖)
IDT法
二、Primer Bank
1) 進入NCBI搜索想要的基因後,記下其基因ID和相應來源
2) 進入Primer Bank官網
選擇NCBI Gene ID以及相應的來源(本方法弊端是只能選擇人源和鼠源),輸入NCBI上搜索是ID號,點擊Submit,會出現多對引物,需要選擇一對特異性最好的引物。
Primer Bank
三、生工免費設計引物(懶人福音)
1) 註冊登錄生工官網,點擊DNA合成
2) 選擇免費引物設計
3) 根據自己的需要以及上面所教方法,填寫基因信息即可,生工會在24小時內為您提供設計好的引物
生工免費設計
設計完成後可一鍵下單,生工小哥就會騎上他心愛的小摩託來給你送貨啦~(南京地區)
-溫馨提示-
引物設計完成後記得去NCBI BLAST驗證噢~