【熱點關注】新冠終結又添利器!我國科學家成功研發抗新冠病毒特異馬血清並有望實現產業轉化

隨著新冠肺炎疫情的發展，SARS-CoV-2病毒的神秘面紗逐步揭開，群眾也不再談毒色變，其實任何病毒都是可防可控。注意公共衛生，減少聚集可有效防止該病毒的迅速播散，疫苗是控制大流行重要利器之一，而對於住院患者，尤其是重症患者，抗血清或特免則是治療的又一重器。近日，中國科學院武漢病毒研究所肖庚富團隊聯合上海賽倫生物公司和武漢友芝友生物公司成功研發抗新冠病毒特異馬血清製品，並已啟動了新藥申請註冊工作。疫情早期，武漢生物製品研究所的抗新冠病毒人特免在治療中就發揮了重要作用（詳見重磅消息！中國生物治療性新冠特免血漿製品投入臨床）。相關研究成果在線發表於Antiviral Research雜誌。

本研究採用CHO細胞穩定表達，獲得克級SARS-CoV-2 的S蛋白受體結合域RBD蛋白，並證明其具有正確的構象結構和良好的免疫原性，研究結果表明，RBD重組蛋白不僅可在小鼠體內誘導中和抗體的產生，還可高效誘導馬產生中和抗體：採用抗原劑量依次遞增的方法免疫三次後，馬抗血清在體外中和新冠活病毒的滴度（NT50）大於10240。為避免抗體Fc段在體內造成過敏反應或潛在的抗體依賴的感染增強作用（ADE），研究人員進一步採用胃蛋白酶切除了免疫球蛋白Fc段，保留抗體的活性片段F(ab』)2。在此基礎上，研究人員通過特異性親和層析對F(ab』)2做進一步純化，獲得了高親力（KD=0.76 nM）的RBD-specific F(ab』)2，並通過活病毒中和試驗測得其體外作用IC50為0.07 μg/ml。

A：RBD抗原設計；B：馬免疫策略；C：馬抗血清中和滴度；D：RBD-specific F(ab』)2對RBD的親和力；E：RBD-specific F(ab』)2對SARS-CoV-2的中和活性

本研究獲得的抗體可作為治療SARS-CoV-2感染的候選藥物，且已向國家藥監局提交了新藥申請。本研究由三家單位共同完成：武漢病毒所負責研究的設計、抗原有效性測試、抗體純化、抗血清及抗體活病毒中和測試等工作；上海賽倫生物負責馬抗血清及F(ab』)2製備；武漢友芝友生物負責RBD抗原的表達和純化。相信該製品可有望轉化生產，造福群眾。馬血清來了，人特免製品相信也快了！

附文獻信息：

題目：Immunoglobulin fragment F(ab』)2 against RBD potently neutralizes SARS-CoV-2 in vitro

DOI：10.1016/j.antiviral.2020.104868

摘要：COVID-19, which is caused by the emerging human coronavirus SARS-CoV-2, has become a global pandemic that poses a serious threat to human health. To date, no vaccines or specific antiviral drugs have been approved for the treatment of this disease in clinic. Herein, therapeutic antibodies for SARS-CoV-2 were obtained from hyperimmune equine plasma. First, a recombinant SARS-CoV-2 spike protein receptor-binding domain (RBD) was obtained in gram-level quantities through high-cell density fermentation of Chinese hamster ovary cells. Then, the binding of the RBD to the SARS-CoV-2 receptor, human angiotensin-converting enzyme 2, was verified by several biochemical methods. The efficacy of the RBD in triggering antibody response in vivo was subsequently tested in both mice and equines, and the results showed that the RBD triggered high-titer neutralizing antibody production in vivo. Immunoglobulin F(ab』)2 fragments were prepared from equine antisera via removal of the Fc region from the immunoglobulins. Finally, a neutralization test with live virus demonstrated that RBD-specific F(ab』)2 inhibited SARS-CoV-2 with an EC50 of 0.07 μg/ml and an EC80 of 0.18 μg/ml, showing a potent inhibitory effect on SARS-CoV-2. These results highlight RBD-specific equine immunoglobulin F(ab』)2 fragment as a candidate for the treatment of SARS-CoV-2.

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本期編輯：hantavirus

本文轉自病毒學界。