鐵皮石斛是我國傳統名貴中藥材,《中華人民共和國藥典》的所有版本中均有記載,具有益胃生津和滋陰清熱之功效,常用於熱病津傷,口乾煩渴,胃陰不足,食少乾嘔,病後虛熱不退,陰虛火旺,骨蒸勞熱,目暗不明,筋骨痿軟等症之治療。長期食用可有效提高人體免疫力。由葡萄糖和甘露糖等單糖組成的葡甘露聚糖(多糖)被認為是鐵皮石斛中的主要功能活性成份之一,具有抗氧化、降血糖、預防脂肪肝和增強人體免疫力等生物活性。鐵皮石斛多糖活性的高低與其乙醯化修飾程度有關,多糖中O-乙醯基含量越高,其水溶性越好且生物活性越強。但目前有關鐵皮石斛多糖乙醯化修飾方面的研究還很少。
中科院華南植物園農資中心司燦博士在段俊教授的指導下,對鐵皮石斛多糖乙醯化修飾的分子機制進行了研究,發現鐵皮石斛中的O-乙醯基主要在莖稈中積累,其次是葉和花。並從鐵皮石斛基因組中鑑定、克隆和分析了三個鐵皮石斛多糖乙醯化調控基因RWA(DoRWA1、DoRWA2和DoRWA3),啟動子分析顯示,這3個基因均含有脫落酸響應元件,相對表達量在脫落酸處理下均呈先升高後降低的趨勢;亞細胞定位結果顯示它們均定位於內質網中,暗示內質網可能為多糖乙醯化反應的場所;螢光定量PCR顯示這三個基因中DoRWA3的表達量最高,且和鐵皮石斛多糖合成相關基因具有相同的表現趨勢;35S::DoRWA3轉基因株系和野生型相比,種子、葉片和莖稈中的乙醯化水平顯著上升,表明DoRWA3參與了鐵皮石斛多糖的乙醯化過程。該研究為鐵皮石斛種質改良和多糖相關產品的開發提供了理論參考。
相關研究成果已發表在國際學術刊物International Journal of Molecular Sciences(《國際分子科學雜誌》)上。
圖1. 組培苗和成苗的水溶性多糖和O-乙醯基含量。
圖2. DoRWA3在擬南芥中超表達。
論文連結:
https://www.mdpi.com/1422-0067/21/17/6250
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