國際豬業專家原創文章(文摘-快速檢測豬肉中剛地弓形蟲的環介導等溫擴增技術的建立)

2021-01-19 pig333世界豬業之窗

本實驗建立的環介導等溫擴增技術可為檢測剛地弓形蟲基因DNA提供一種簡單，特異，敏感和快速的方法，故期望其在多種食品監測剛地弓形蟲汙染中起到重要作用。


環介導等溫擴增技術(LAMP)是一種新興的快速擴增DNA的方法，且在等溫的條件下具有高特異性和高敏感性。本實驗我們使用針對剛地弓形蟲的高度保守區域 ITS-1序列的6種引物建立了環介導等溫擴增技術。在等溫的條件下（65 °C水浴）可在30分鐘內完成擴增程序，特異性實驗證實與犬新孢子蟲，柔嫩艾美耳球蟲，隱孢子蟲，李斯特菌和豬鏈球菌 DNA模板間沒有交叉反應性。


LAMP的檢測極限為0.9飛克剛地弓形蟲基因DNA，其敏感性是傳統PCR實驗的10倍。使用LAMP和傳統PCR實驗檢測來自中國浙江的118份豬場樣本的剛地弓形蟲DNA。結果表明LAMP的敏感性遠高於傳統的PCR (13.56% 和 9.32%)


Xunhui Zhuo, Bin Huang, Jiaqing Luo, Haijie Yu, Baolong Yan, Yi Yang, Aifang Du. Development and application of loop-mediated isothermal amplification assays based on ITS-1 for rapid detection of Toxoplasma gondii in pork.



來源：PIG333 獨家

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