組織培養的設備和條件
一、植物組織培養的條件
1、嚴格無菌植物組織培養的整個操作過程和培養過程都要求在嚴格無菌條件下進行，無菌是組織培養成功的首要條件。操作過程在接種室內超淨工作檯上進行；外植體材料要進行表面消毒；配製的培養基要進行高壓滅菌消毒。
2、溫度處理整個操作過程和培養過程都在恆溫條件下進行，一般在27℃之間，熱帶植物可偏高些，脫毒植物需高溫處理。
3、光照處理植物器官的產生必須有光，某些植物器官的產生在無光條件下，但它的生長和發育必須有光。莖尖的生長及試管苗的繼代增殖以3000光強度適宜；生根試管苗以3000宜。光質對愈傷組織誘導、增殖、器官的分化有不同的影響。光周期誘導一般是16h，黑暗是12h，對光周期敏感植物要掌握光照時間，否則影響植物的分化。
4、培養基的酸鹼度培養基的酸鹼度因植物的種類不同而異，大多數植物要求在5.8之間，喜酸性培養的植物要求酸鹼度偏高。
二、培養基的成分及配製
1、培養基的成分用於植物組織培養的培養基，迄今不下幾十種。歸納起來，任何一種培養基均有以下幾部分組成：無機鹽（大量元素、微量元素），有機化合物（蔗糖、維生素類、胺基酸、核酸及其他水解化合物），鐵鹽螯合劑，植物激素。植物激素對於組織培養的成功至關重要。接種的外植體的分化速度和分化方向—一長芽或長根，均取決於所加激素的種類、數量及比例。簡而言之，主要是生長素類和細胞分裂素類的加入量以及兩者的比例。一般生長素類包括吲哚乙酸、吲哚丁酸、萘乙酸；細胞分裂素類包括激動素、苄基氨基嘌呤、二甲基丙烯氨基嘌呤。培養基中的糖類主要是蔗糖，少數情況下使用葡萄糖。大批生產亦可使用食用糖。糖在培養基中的作用是提供碳源，同時用於維持滲透平衡，瓊脂是固體培養基中的成分，作為固化劑支持培養物在培養基的成本消耗中，瓊脂佔有相當大的比例。培養基中瓊脂的加入量一般為10g。
2、母液的製備組織培養用於生產實際中，有時培養基的用量相當大，需一批一批地連續配製。為簡化配製過程，提高工作效率，將各種所需藥品先配製成高濃度溶液，貯備起來。到配製培養基時，按要求的濃度取一定量稀釋即可。我們稱這些高濃度的溶液為貯備液，習慣上稱母液。製備母液時，先將所有藥品分成幾組，每組藥品製成一種母液。分組的原則是同組藥品混合溶解時不會發生質的變化，也不產生沉澱。一般將藥品分成5組：大量元素、微量元素、鐵鹽、有機化合物類和植物激素。其中植物激素母液有若干種，每種激素都先製成1mg/ml的溶液。母液製備過程中，有如下三點需要注意：
（1）藥品稱量要儘可能準確。大量元素用千分之一工業天平稱取，而微量元素、有機物類、植物激素等，則必須使用千分之一的天平。
（2）母液配製完畢注入試劑瓶以後，一定要標明母液的名稱、序號、濃度和配製日期等。
（3）配製好的母液應放置的冰箱內保存，尤其是有機物和激素類。生產中常用的培養基以培養基為主。現以培養基為例介紹培養基的成分組成和配方。
三、培養基的配製
1、將用於配製培養基的容器洗淨，加入培養基總量四分之三的蒸餾水，放入所需的瓊脂和糖，然後加熱溶解。在加熱過程中應注意不斷地攪拌，以避免瓊脂粘鍋或溢出。
2、待瓊脂和糖完全溶解後，按表中所列的順序加入各貯備液以及所需的植物激素。
3、用蒸餾水定容補充由於加熱蒸發所損失的體積。
4、用蒸餾水調整pH。
5、通過漏鬥或下口杯將培養基注入三角瓶或試管內，注入量為瓶容積的三分之一。灌裝動作要迅速，且儘可能避免培養基粘在瓶壁上。應在培養基未冷卻前灌裝完畢。
6、用棉塞或塑料封口將瓶口或試管口封嚴。
7、將封裝好的三角瓶或試管碼放在高壓滅菌鍋內。於105Pa壓力、121℃下滅菌20分鐘。如使用小型手提式滅菌鍋時，一定要注意，加熱後，當鍋內壓力上升時，先反覆放氣數次，將鍋內空氣排盡以後，再計算時間，否則，達不到高壓滅菌的效果。
8、對於一些受熱易於分解的物質，如維生素類，可採取先過濾滅菌的方法。待培養基滅菌後，尚未冷卻之前（40℃左右），加入並搖勻。經過高壓滅菌的培養基可在室溫下存放5天，或在冰箱內存放10天左右。提倡儘可能在短時間內用完。