組織玻璃化凍存技術:優勢與尚未完全解決的問題

2020-08-10 中國組織工程研究雜誌

摘要:

文題釋義:

玻璃化冷凍保存:是利用這些高濃度的低溫保護劑組合成玻璃化凍存液,通過與水分子發生強烈的水合作用,增加溶液黏性,降低冰晶形成速度,從而使細胞在快速降溫或復溫過程中得以保護。

玻璃化:對於非晶高分子,當高分子通過降溫從高彈態轉變為玻璃態,或者通過升溫從玻璃態轉變為高彈態的過程稱之為玻璃化轉變,發生玻璃化轉變的溫度叫玻璃化轉變溫度。對於結晶高分子,玻璃化轉變是指其非晶部分所發生的由高彈態向玻璃態(或者玻璃態向高彈態)的轉變。因此,玻璃化轉變是高分子中普遍存在的現象。但是玻璃化轉變現象並不局限於高分子,一些小分子化合物也存在玻璃化轉變。

背景:玻璃化冷凍保存是一種應用前途廣闊的低溫冷凍方法,通過使用高濃度的玻璃化凍存試劑將生物材料進行玻璃態轉變,從而實現活性保存。

目的:就玻璃化凍存的生物學原理及玻璃化凍存試劑的分類,卵巢、皮膚與角膜等醫學組織標本的玻璃化凍存進行綜述。

方法:以「tissue;vitrification;cryopreservation」為英文檢索詞;「組織;玻璃化;冷凍保存」為中文檢索詞,檢索1994年1月至2019年10月 PubMed 資料庫及萬方醫學網相關文獻。按照納入與排除標準篩選後,對最終納入的45篇文獻進行歸納總結。

結果與結論:玻璃化凍存可以防止細胞內外冰晶形成,避免了冰晶給細胞帶來的多種損傷,有效保留了細胞的生物活性與基本功能。玻璃化凍存試劑主要分為滲透性和非滲透性2種,其操作簡便、高效,唯一的缺點是高濃度的凍存試劑對細胞具有一定的毒性損傷。為了降低對組織整體損傷風險,可以混合使用多種低毒凍存試劑。目前玻璃化凍存技術已經成功應用於多種細胞,但組織凍存的技術難題尚未完全解決。

ORCID: 0000-0003-0140-9935(張源)

中國組織工程研究雜誌出版內容重點:組織構建;骨細胞;軟骨細胞;細胞培養;成纖維細胞;血管內皮細胞;骨質疏鬆;組織工程

關鍵詞: 組織, 玻璃化, 冷凍保存, 凍存試劑, 卵巢, 皮膚, 角膜

文章來源:張 源, 曾 敏, 翟 博. 組織玻璃化凍存技術:優勢與尚未完全解決的問題[J]. 中國組織工程研究, 2020, 24(23): 3751-3755.

相關焦點

  • 什麼是玻璃化冷凍保存?
    玻璃化冷凍保存是一種應用前途廣闊的低溫冷凍方法,通過使用高濃度的玻璃化凍存試劑將生物材料進行玻璃態轉變,從而實現活性保存。形成冰晶的危險溫區介於-15 ℃至-50 ℃之間,採取適當的冷凍方法和優化的凍存液成分配比可以使細胞在凍存和復甦過程中快速安全通過危險溫區,有效避免冰晶的產生。①滲透性玻璃化凍存試劑:二甲基亞碸被認為是滲透性玻璃化凍存試劑中最優選的細胞保護劑。由於玻璃化凍存試劑需要保持較高濃度,在凍存液導入及洗脫過程中對細胞及組織有毒性損害,所以細胞凍存後必須進行洗滌,清除降低凍存試劑的毒性影響。
  • 幹細胞的凍存速率_中科博生
    探索一種合適的凍存速率是困難的,因為如果降溫速率過快,細胞內水分來不及外滲就已經凍結成冰,在細胞內外同時形成許多冰晶。小冰晶本身對細胞有一定的機械損傷,更重要的是在復溫過程中易附著在尚未融化的較大冰晶表面,形成許多更大的冰晶,對細胞造成損害,此即"胞內冰損傷"(intracllular icedamage)。
  • 人體冷凍技術是通向未來之路,還是在販賣虛假希望
    看要點就夠了):1、低溫凍存技術有一定的科學基礎支撐。利用現代低溫冷凍保存技術,人們已經成功凍存了很多種類的細胞,如成纖維細胞、脂肪細胞、腫瘤細胞、幹細胞,以及精子和卵母細胞。2、冷凍會對人體細胞組織產生不可逆的傷害,目前人體保存組織多採用玻璃化凍存技術來儘量減少這種傷害。
  • 紅細胞的凍存
    (2)紅細胞的冷凍保存其降溫方法一般有3種,即高濃度甘油慢凍法、低濃度甘油速凍法及玻璃化|低溫保存法。高濃度甘油慢凍法 甘油濃度為40%,甘油中含有乳酸鈉、氯化鉀、氯化鈣、甘露醇或乳糖等,並使溶液 pH維持在6.8左右。在5~6min 內將細胞降溫至一80℃以下,細胞解凍後存活率一般為80%~90%。
  • 科學家發明「零損傷」復甦冷凍人體細胞技術,器官短缺將得到改善
    暫且不提科幻電影中利用冬眠艙延長人類壽命,如果能夠冰凍保存器官,器官短缺問題就能得到很好的解決。調查顯示,僅僅在美國,每天因等待器官移植而死去的人就高達22人。而器官短缺問題,很多時候不是因供體不夠,而是因為捐贈的器官不能被長時間的保存,在到達患者之前就「壞了」,不具備生物活性了。比如,心臟和肺只能在冰上存放最多四個小時;肝、小腸和胰腺只能存放8-12個小時。
  • 加速卵母細胞凍存材料產業化,破譯生物「冷凍-復活」密碼
    王健君介紹說,這種療法要大面積推廣應用,也必須有凍存技術支持,從製備到注射之前,要實現大量凍存。雖然有著重要的應用領域,然而生活經驗告訴我們,將一個活體低溫冰凍之後,會變成僵硬的凍塊,解凍之後會失去活性。這是由於不受控制的冰晶在形成和生長過程中,會對細胞造成損傷。那麼該如何解決這一問題呢?
  • 玻璃化溫度與邦定技術
    1、前言    金屬效果粉末塗料的生產以往大多採用幹混法(Dry-Blending),時常發生金屬效果顏料與底粉分離,回收粉噴塗時顏色差異大,金屬效果顏料堵槍頭,靜電噴塗施工困難等問題。用珠光顏料配製的粉末塗料上述問題更加明顯。
  • 液氮凍存細胞應注意哪些問題
    遇到這類現象我們應該採用哪種方法解決呢?凍存管細胞常見問題:12:凍存管的蓋子一定要擰緊,防止復甦水浴的時候滲水現象,造成二次汙染,選擇管子或者蓋子的時候儘量選擇原裝的。3:凍存盒過於單薄,細胞被迅速降溫,應選擇厚的泡沫塑料盒,或者塞入大量幹棉花,這樣降低細胞溫度變化幅度大。4:液氮面應該高於細胞界面,這樣才能維持活性。5:為了防止錯拿細胞,每支凍存管上都標上細胞名稱及時間,做好記錄。
  • 探秘玻璃化冷凍技術
    提起組織器官,乃至人體的低溫保存,很多不明就裡的人認為該過程就是直接將組織樣本放進低溫容器,其容易程度就像是將超市買回來的肉丟進冰箱那麼簡單。可事實遠非如此!在日常生活中,我們會發現,將水果蔬菜放到冰箱,結冰位置會變質變壞。這是因為,水結冰刺破了細胞以及其內容物造成的。而人體內70-80%是水分,如果直接冷凍,同樣會形成冰晶,便失去了保存的意義。
  • 中國標準化研究院王秀騰:《固體廢物玻璃化處理產物技術要求》標準...
    據了解,《固體廢物玻璃化處理產物技術要求》標準(下稱「標準」)由中國標準化研究院、環保部固體廢物管理中心、中國再生資源回收利用協會危險廢物專業委員會、各龍頭企業、高等院校及科研院所共同起草。  王秀騰表示,該標準將與環保部通常發的汙染控制標準有所區別,標準主要的定位是界定玻璃態的產物是什麼,以及用什麼樣的標準等基礎問題,立足於玻璃態產物的資源化利用。
  • 細胞凍存秘籍,你學會了嗎?
    這可以有效防止因汙染或技術原因導致的細胞損失。而低溫保存對於維持細胞株的遺傳特性也極為重要。看似簡單的凍存細胞,如果操作不當,將導致長期培養的細胞付之東流。小編將來自ATCC的《哺乳動物細胞凍存指南》翻譯為中文。看大拿們如何凍存細胞。養細胞的小夥伴不容錯過。細胞凍存是否成功取決於四個關鍵因素:        1.
  • 王健君:實證百年科學猜想,人體凍存未來可期
    這一基礎科學問題的突破,為食品、航空、醫療、生物等領域的應用提供了科學支持。當冰凍過程可控,作為超越人類極限的人體凍存技術或許可以期待。大家可能知道冷凍保存,因為每家每戶都有冰箱,冰箱就有冷凍保存的功能。但是大家可能也會很好奇,為什麼這幾年冷凍保存這麼受關注,甚至有爭議?
  • 玻璃化溫度詳解
    在高聚物發生玻璃化轉變時,許多物理性能發生了急劇的變化特別是力學性能。在只有幾度範圍的轉變溫度區間前後,模量將改變三到四個數量級,使材料從堅硬的固體,突然變成柔軟的彈性體,完全改變了材料的使用性能。作為塑料使用的高聚物,當溫度升高到發生玻璃化轉變時,失去了塑料的性能,變成了橡膠;而作為橡膠使用的材料,當溫度降低到發生玻璃化轉變時,便喪失橡膠的高彈性,變成硬而脆的塑科。
  • Gibco Recovery細胞凍存培養基: 便捷即用的凍存方案
    來試試GibcoTMRecoveryTM細胞凍存培養基!它可以為您提供便捷即用的細胞凍存方案:✦ 提高細胞復甦率——復甦後的細胞存活率更高✦ 更快獲得實驗結果——獲得更多活細胞,您可以儘快開始實驗✦ 即用型凍存混合物——無需使用多種成分進行配製✦ 提高安全性——無需處理和混合DMSORecovery細胞凍存培養基是一種完整的即用型凍存培養基,用於冷凍保存各種哺乳動物細胞,助您提高細胞復甦率
  • 王宇傑小組揭示玻璃化轉變結構機制—新聞—科學網
    本報訊(記者黃辛)上海交通大學物理與天文系研究員王宇傑研究組通過研究硬球玻璃的模型體系——顆粒體系,揭示玻璃化轉變可能是一種特殊的結構相變
  • 來自ATCC的《哺乳動物細胞凍存指南》,請查收
    這可以有效防止因汙染或技術原因導致的細胞損失。而低溫保存對於維持細胞株的遺傳特性也極為重要。看似簡單的凍存細胞,如果操作不當,將導致長期培養的細胞付之東流。小編將來自ATCC的《哺乳動物細胞凍存指南》翻譯為中文。看大拿們如何凍存細胞。養細胞的小夥伴不容錯過。細胞凍存是否成功取決於四個關鍵因素:1.
  • 玻璃化轉變研究取得重要進展
    液體在快速降溫或加壓的時候會避免結晶而轉變為非晶態的玻璃,幾乎所有凝聚態體系都可以形成玻璃態,因此,玻璃化轉變是個普遍存在的物理現象。然而,作為非晶液-固轉變的代表,玻璃化轉變無法簡單歸類於已知的相變類型,從而使它的相變本質成為困擾凝聚態物理多年的難題。Science在創刊125周年的時候提出了125個本世紀亟待解決的重大科學問題,「玻璃態的本質是什麼」就位列其中。
  • 蝴蝶蘭組培種苗生產技術 蝴蝶蘭組織培養技術
    蝴蝶蘭組培種苗生產技術 蝴蝶蘭組織培養技術1 蝴蝶蘭組織培養技術1.1 無菌苗獲得 蝴蝶蘭花梗作為外植體,不僅易獲得,而且不會損傷植株,容易誘導。選擇側芽飽滿、新鮮、無病毒的蝴蝶蘭花梗,整枝取下。在切取花梗時要注意將刀片消毒,以防微生物感染。
  • 玻璃化轉變溫度測試方法介紹
    有任何問題歡迎微信聯繫我溝通交流,個人微信號「Sammy-Mosch」本公眾號文章未經授權不歡迎任何公眾號和網站轉載
  • 橡膠高分子名詞:玻璃化溫度詳解
    在高聚物發生玻璃化轉變時,許多物理性能發生了急劇的變化特別是力學性能。在只有幾度範圍的轉變溫度區間前後,模量將改變三到四個數量級,使材料從堅硬的固體,突然變成柔軟的彈性體,完全改變了材料的使用性能。作為塑料使用的高聚物,當溫度升高到發生玻璃化轉變時,失去了塑料的性能,變成了橡膠;而作為橡膠使用的材料,當溫度降低到發生玻璃化轉變時,便喪失橡膠的高彈性,變成硬而脆的塑科。