肌張力障礙(DT)大鼠模型的建模方法

來源：3-硝基丙酸（3-NP）導致肌張力障礙

模式動物品系：SPF級SD大鼠，健康,6~8W，體重為180g-200g

實驗分組：正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組

實驗周期：2~4w

建模方法：肌張力障礙是繼特發性震顫和帕金森病後的第三大運動障礙疾病。3-NP是琥珀酸脫氫酶的不可逆抑制劑，影響線粒體功能，有研究揭示揭示3-NP損傷紋狀體從而引起繼發肌張力障礙。
1.大鼠肌張力障礙建模及鑑定
1.1 建模方法
SD雄性大鼠適應性餵養一周後進行實驗。模型組大鼠經100g/L的水合氯醛麻醉後，固定在立體定位儀上。確定左側尾殼核坐標為前囟1mm、矢狀縫左側3mm、硬膜瞎~7mm。常規消毒，切開頭部皮膚、皮下組織，鈍性分離顱骨外膜，充分暴露前囟及左側顱骨，鑽開顱骨（注意不要損傷硬腦膜）。用微量注射器將3-NP溶液（1000nmol/ul）注入靶點，每次注射4ul。硬膜下4~7多點注射，注畢留針5min，緩慢退針。對照組在相同部位注入生理鹽水。術後動物在同樣環境下常規飼養。

應用：疾病模型

模型評價

1.平板評分:
所有動物在建模前進行平板訓練：在離地1m高的兩平臺之間架一窄平板，長120cm、寬7cm。所有大鼠每天訓練3次，持續7天，確保每隻大鼠均能順利通過平板，中間無停留。記錄每隻大鼠通過平板的時間和步數，用以計算步幅。
術後5天，將各組動物進行平板實驗，記錄每隻大鼠通過平板的時間和步數，用以計算步幅。
2.運動協調能力檢查：
採用轉棒實驗的方法對大鼠運動協調能力進行量化測試。分別測試大鼠在轉動的轉棒上，9r/min和18r/min時，動物在棒上的停留時間，每隻動物在每個轉速下測量3次，取平均值。
3. 取材及檢測:
術後7天殺鼠取樣，取腦組織及血清樣本。

組織病理學

HE染色和尼氏染色：
取腦組織，經過包埋，切片，進行HE染色和尼氏染色觀察病理變化，主要觀察紋狀體、中腦和海馬結構內神經元的變化。

統計學分析

應用SPSS軟體進行統計分析，計量資料以均數±標準差（x ±ｓ）表示，採用ｔ檢驗，組間比較採用單因素方差分析，P<0.05表示有顯。