肺氣腫大鼠模型的建模方法

來源：蛋白酶致肺氣腫

模式動物品系：SPF級SD大鼠，健康，3-4W，體重為200g-220g。

實驗分組：實驗分六組：正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組。

實驗周期：4-6 weeks

建模方法：

10%水合氯醛麻醉大鼠，行氣管插管，用1ml注射器抽吸事先配製的8%木瓜蛋白酶液（0.5ml/kg BW）注入，而後將大鼠直立，垂直旋轉大鼠，使藥物在肺內均勻分布，將老鼠放在加熱墊上。待老鼠清醒後正常飼養。 正常對照組的大鼠做同樣的操作，但向氣管內注射等體積的生理鹽水。 術後每日給與模型組大鼠相應的藥物或生理鹽水灌胃，每日一次至取材。

應用：疾病模型

模型評價 每隻大鼠一周給藥一次： A: 正常對照組+生理鹽水 B: 模型對照組：模型組+製劑配方組 C: 模型組+待測藥物幹預組（高，中，低）： 注射低濃度組 注射中濃度組 注射高濃度組 D: 陽性藥物幹預組：模型組+ 陽性藥物（硫酸特布他林片）霧化給藥，動物存續期內一直給藥。 分別在術後1W、2W、4W時每組各取幾隻大鼠，取左肺用於病理學檢測。 收集血清：大鼠處死，從腹主動脈收集全血和分離出血清，-20度保存。 肺組織勻漿：大鼠處死，取肺，進行組織勻漿和離心，-80度保存。

組織病理學 肺組織病理學檢測： 分別在術後1W、2W、4W時每組各取若干只大鼠，麻醉後取左肺4%多聚甲醛固定，然後將肺組織常規脫水，石蠟包埋，切片（厚度為3μm），HE染色。 HE染色肺組織學評價可以直觀的反應肺損傷的程度，可直觀判斷肺組織的水腫、出血、炎症細胞浸潤、肺泡壁厚度改變及小氣道損傷等變化。