精囊阻塞(SVO)大鼠模型的建模方法

2020-09-18 雲克隆

來源:絲線進行雙側精囊結紮術

模式動物品系:SPF級SD大鼠,雄性,8周齡。

實驗分組:驗分六組:正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組

實驗周期2 weeks

建模方法8周齡雄性Wistar大鼠50隻,保持環境溫度20~25℃,溼度40~70%。飼餵普通飼料適應性餵養1周後,從中隨機抽取25隻作為sham組,其餘25隻(seminal vesicle occlusion組)採用戊巴比妥鈉麻醉後,腹部開15-20mm長的切口,暴露精囊後,使用絲線進行雙側精囊結紮術,之後將精囊置回原位,切口縫合,自然清醒。而sham組腹部開15-20mm長的切口,暴露精囊後,置回原位,切口縫合,自然清醒。

應用疾病模型

模型評價 1.精囊阻塞對大鼠臟器係數的影響 1.1精囊大小觀察 大鼠在處死前禁食12h,稱取各組大鼠體重。之後經戊巴比妥鈉麻醉後處死,剖腹後,暴 露精囊,攝片,觀察各組大鼠精囊大小。 1.2臟器重量檢測 取雙側睪丸、附睪、精囊並剝離周圍脂肪組織,用冷生理鹽水衝洗,除去血液,濾紙濾幹, 電子天平稱重。計算臟器指數:臟器指數=臟器重量/大鼠體重。 2.精囊腺的分泌功能 2.1分泌量 摘取精囊後稱取精囊重量後,擠出精囊液,收入試管,電子分析天平稱重記錄。 2.2果糖濃度 將精囊液加入糜蛋白酶水溶液,液化後按照果糖試劑盒測定果糖濃度。 精囊阻塞大鼠模型中精囊較小,精囊分泌量降低,精囊液果糖濃度降低; 3.精囊阻塞對大鼠的性功能的影響 實驗時間安排在燈暗後1小時。實驗前24h雌性大鼠(10隻)皮下注射苯甲酸雌二醇注射液30ug/只,實驗前4h雌性大鼠(10隻)皮下注射黃體酮注射液50 ug/只。燈暗安靜環境下行交配實驗,先將雄性大鼠放入50cm×30cm×20cm (籠子大小看具體情況可調整)的觀察籠中適應10min,再向每隻籠中放入1隻發情雌鼠,雌鼠放入後立即觀察記錄雄鼠2h內的性行為情況。觀察的參數為: 1.爬高潛伏期(mount latency, ML):與雌鼠同籠至第1次爬高所需的時間 2.爬高次數(mount frequency, MF):2h內爬高總次數,不管有無插入 3.插入潛伏期(intromission latency, IL):與雌鼠同籠至第1次插入所需的時間 4.插入次數(intromission frequency, IF):2h內插入總次數 5.射精潛伏期(ejaculation latency, EL):第1次插入至射精所需的時間 6.射精次數(ejaculation frequency, EF):2h內有射精獲得大鼠各自射精次數 7.射精活動鼠數(rat number of ejaculation behavior, EBN):有射精活動的大鼠數 8.命中率(hit rate, HR):插入次數與爬高次數的比率 第二日燈亮後,觀察雌性大鼠陰道是否出現陰道栓,發現則記為交配成功,如未發現,拭子插入陰道,塗片鏡檢,發現精子則為交配成功。

組織病理學 精囊阻塞對大鼠精囊組織結構的影響 精囊液徹底擠盡後,一側精囊放入甲醛溶液中,製作石蠟切片,HE染色,在顯微鏡下閱片並攝片,觀察病理情況。 精囊病理切片可見精囊腺腔內有許多皺襞,表面為假復層柱狀上皮,細胞內含有分泌顆粒、脂肪滴及脂褐素;

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