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支原體汙染的來源是什麼?具有普遍性嗎?易被發現嗎?
支原體汙染來源: ●人:操作者無菌操作技術不當 ●物:被汙染的培養基、血清、細胞、製備細胞的原始組織或器官的交叉汙染。
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支原體汙染的影響是什麼?如何應對呢?
因此,被支原體汙染的細胞會持續受到影響,導致實驗數據不準確。支原體汙染不僅是細胞培養中需要克服的現象,而且是製藥、生物製品生產中需要加以避免的。支原體汙染的影響是什麼?具體操作流程見下圖:Mynox祛除貼壁細胞中支原體的流程圖Mynox殺除支原體功能強大有效,但由於價格昂貴,上圖中使用的200ul人民幣要5000元左右,使得應用於細胞保種的數量受到價格的限制。方法三:對於已耗費很多時間,大量擴增起來的細胞,或經過基因轉染、體外刺激等大量工作處理過的細胞,如果發現細胞被支原體汙染了,怎麼辦?
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不可小看支原體汙染問題
但其實,更嚴重的是支原體 的感染,它的發生率非常高,而且不易被發現。不僅普通光鏡下無法發現支原體,而且培養基也不容易變色。只有在汙染的後期培養基才容易變黃。下圖為支原體嚴重汙染後的表現:那麼,支原體汙染為什麼發生率這麼高?
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科研人員為什麼不能忽視支原體汙染的存在?
但其實,更嚴重的是支原體 的感染,它的發生率非常高,而且不易被發現。不僅普通光鏡下無法發現支原體,而且培養基也不容易變色。只有在汙染的後期培養基才容易變黃。細胞培養中有幾種支原體汙染與人、牛和豬有關。實驗室的工作人員是口腔支原體、發酵支原體和人型支原體的主要來源。這三種支原體佔細胞培養中支原體汙染的一半以上,它們主要存在於人的口咽部。支原體也存在於人的頭髮、皮膚上。胰酶如果是豬來源的,那麼也可能存在豬鼻支原體。以下為支原體汙染的主要途徑。
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細胞總培養不好,你考慮過是支原體在作亂嗎
導致細胞生長緩慢的常見原因:細胞生長緩慢;細胞變形;碎片增加;懸浮細胞容易成團;培養基提前變色;鏡下發現有小黑點;如果排除了其他試劑選擇不當、細胞株老化、細菌汙染……原因,而仍有上述一種或幾種情況,則高度提示:細胞可能出現了支原體汙染。
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同樣是細胞被支原體汙染,怎麼挑選支原體祛除劑
養細胞時,除了支原體的檢測需要定期進行外,支原體的預防和祛除也是一個重要方面。它包括工作區域中的支原體的預防和祛除和培養箱水槽、水浴鍋中預防支原體的汙染。但一旦發生細胞培養時有支原體汙染,應如何挑選支原體祛除劑呢?這裡指的支原體祛除劑,是加入到細胞培養基中來發揮作用。德國MB有三種支原體祛除劑,都是加入到細胞培養基中使用。它包括:1.
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培養細胞時你需要考慮支原體祛除劑的問題嗎
支原體汙染幾乎可影響所有細胞之生長參數,代謝及研究之任一數據。本文威正翔禹/締一生物為您分析細胞培養中什麼情況會考慮支原體汙染?●培養基過早變色(變黃);●明顯的細胞生長率下降,生長緩慢,破碎細胞多;●懸浮細胞特別容易成團
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勿讓支原體成為培養細胞的殺手
有時看到論文裡,會寫到在培養細胞時,一周檢測一次支原體,為什麼會出現這種情況呢?原來,支原體很容易成為培養細胞的殺手。支原體直徑約0.1-0.3µm,比細菌還小。它容易附著於細胞表面,與宿主細胞胞膜融合併交換成分。環境中很容易存在支原體,人體也容易攜帶支原體。
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PCR檢查支原體是對藥典方法的重要補充
支原體是導致體外細胞汙染的重要汙染源。用於生物製品生產的細胞基質或治療性細胞。產品被支原體汙染後,支原體或支原體代謝產物可進入人體,並對人體產生嚴重危害。因此,對支原體汙染的有效檢測是確保細胞基質及治療性細胞產品質量的前提。
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什麼是病毒?它和細菌有何異同?
什麼是病毒?它和細菌有何異同?病原微生物包括寄生蟲、真菌、細菌、螺旋體、支原體、立克次體、衣原體、病毒等等。病毒就是一種常見的病原微生物。據說,人類疾病中有50%都與病毒有關,而且病毒性疾病基本都是傳染性疾病,例如,目前正在全球肆虐的新型冠狀病毒引起的傳染病,危害極大。因此,了解病毒有利於我們增長防病治病的知識。二、病毒與細菌有何異同?
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先看看有沒有支原體汙染
當實驗結果與預期不一致或無法重複時,先自查——查一下自己的研究樣本,特別是細胞培養是否做到位了,其中有「一點」需特別注意,因顯微鏡下很難觀察到它,沒有視覺,就沒有感知,所以它很容易被忽略。這「一點」就是:支原體汙染!
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同樣是支原體PCR檢測試劑盒,這幾個有什麼區別?
支原體PCR檢測試劑盒是用於細胞上清或生物細胞工業的支原體檢查。它操作簡單、靈敏度高,覆蓋的支原體物種面廣,因此廣受青睞。但市面上品牌很多,五花八門,如何挑選適合自己的試劑盒,需要根據自己的實驗情況和檢測對象(樣本)和需求來確定。
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支原體汙染引發細胞應激狀態的一則報導
支原體是一種大小在細菌和病毒之間、可自我複製的原核細胞。它具有如下特點: 支原體無細胞壁,有簡單的質膜。 具有高度多形性,多呈不規則球狀、長絲狀,可分枝。可穿過0.45 m孔徑的濾膜。
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Nature:大量的細胞研究被支原體汙染摧毀
由於支原體本身的特性,不易被清除,而導致實驗研究中資金和人力的極大損失。賓西法尼大學的研究者John Hogenesch和Anthony Olarerin-George發現,支原體汙染遠比我們想像的更加嚴重和普遍,這篇新聞《支原體毀了多少細胞研究》發表在2014年7月29日的《Nature》,再次引發了細胞學科研工作者對於支原體汙染的關注。
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實驗室/生產環境預防支原體和真菌汙染,更重要
在疫苗生產、生物製藥和細胞培養試驗中,支原體及其他微生物汙染的預防和祛除,是保證生產質量和實驗順利的重要環節。 但在預防細胞支原體及其他微生物汙染方面,實驗室/生產環境的預防實際上更為重要,因為環境中很容易存在支原體的汙染。許多溫暖潮溼的地方,除了容易滋生支原體,還容易生長真菌和細菌。
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哪些情況下細胞會被支原體汙染,紫外照射不一定能殺滅支原體
細胞株若受到細菌、真菌、支原體、或是特定病毒等之汙染時,會嚴重的影響實驗的結果。本文威正翔禹/締一生物為您分析細胞支原體汙染之一般情況。但是若受到支原體之汙染時,細胞之外觀較無明顯變化,但是其汙染會造成細胞之生長速率緩慢、細胞產生病變之型態改變等等變化。
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細胞培養的實驗室對支原體汙染預防有幾種預防
細胞孵箱、水浴鍋等有溫水的地方,也容易滋生支原體、細菌等。以往別的品牌的支原體清除劑,其實只是抑制劑,它們抑制支原體的DNA合成和蛋白合成,但無法殺除。Mynox®是市面上唯一一款具有殺滅作用的清除劑。它提取自枯草桿菌,可與支原體膜特異性結合,破壞膜通透性,導致支原體膨脹破裂而死。使用Mynox®一般在2-3個小時即可完成清除任務。
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檢測細胞培養及生物製品的支原體汙染選用什麼呢
支原體檢測試劑盒Venor®GeM OneStep採用常規PCR方法,並包含PCR需要的所有試劑。其中引物和dNTP、DNA聚合酶、內控對照都包含在PCR預混液(Mix)乾粉中。用途:檢測細胞培養及生物製品的支原體汙染建議適用範圍
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細胞被支原體汙染是每個實驗室常見但不自知的事
因為我是長女,到時候還有一些繁文縟節的東西要弄,想想是既興奮又不安,所以半夜起床來分享實驗(果子:這個是什麼邏輯?)。 在此之前強調一下我的相關研究是有關衣原體的,而不是支原體。每次聽到別人問我,你的支原體做的怎麼樣的時候,雖然我嘴巴上給你解釋我做的是衣原體,但是我的內心是一萬隻草泥馬奔過的。
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如何給細胞做支原體篩查?
其中,保證細胞不受支原體的汙染是決定實驗成敗的重要環節。然而,支原體汙染細胞的發生率又非常高,有報導高達63%。那麼,這些支原體汙染是從哪裡來的呢?常可見以下來源:一瓶被支原體汙染的細胞足以威脅到其他培養的細胞。因此,定期對細胞培養基、細胞培養上清進行支原體的監測是非常重要的。