核苷酸是由含氮的鹼基、核糖或脫氧核糖、磷酸連接而成的,是構成核酸的成分。
核苷酸是一種存在於母乳中且含量豐富,對嬰兒發育有重要作用的營養素,目前在很多國家均被添加於嬰兒配方奶粉中。添加的主要形式有5種:胞嘧啶核苷酸(CMP)、尿嘧啶核苷酸(UMP)、腺嘌呤核苷酸(AMP)、鳥嘌呤核苷酸(GMP),次黃嘌呤核苷酸(IMP)。
GB14880-2012《食品安全國家標準食品營養強化劑使用標準》中規定:核苷酸在嬰幼兒配方食品中的添加量為0.2g/kg—0.58g/kg(以核苷酸總量計)。
為保障國民健康、適應檢測工作的需求,國家衛計委出臺了食品安全國家標準GB5413.40-2016《嬰幼兒食品和乳品中核苷酸的測定》,於2017年3月1日正式實施。下面小編就該檢測方法進行解析。
嬰幼兒配方食品基體較複雜,含有大量蛋白質和脂類,用醋酸溶液調試樣溶液PH到4.1離心後,下層有蛋白沉澱物,上清液較澄清,不影響核苷酸的測定。
為了延長核苷酸的保留時間,在流動相中加入了離子對試劑四丁基硫酸氫胺。由於離子對試劑於色譜柱的固定相結合需要較長的平衡時間,因此採用等度洗脫。
流動相PH不同,分離情況也不同,不同PH下核苷酸的分離譜圖如下圖所示(從左到右出峰依次是CMP、UMP、GMP、IMP、AMP)。因此必要時可以適當調流動相PH至分離最佳情況。
實驗過程中使用的色譜柱為SUPELCOSIL LC-18-T,這種色譜柱的固定相經過特殊處理,特別適合核苷酸和核苷酸的代謝產物的分離測定,在反相高效液相色潽中,由於離子對試劑及磷酸基團的相互作用,延長了核苷酸組分的保留時間。該方法操作簡便快速,適用於日常嬰幼兒配方奶粉中核苷酸的檢測。
目前,GB14880-2012僅對核苷酸的添加總量及每種核苷酸的添加形式進行了限制,但是每種核苷酸以何種比例進行添加沒有規定,因此對於核苷酸的研究仍有很長的路要走。
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