邦耀生物:非病毒CART療法在臨床試驗取得重大進展

上海2020年9月25日 /美通社/ -- 2020年9月25日，聚焦於基因治療和細胞藥物研發公司上海邦耀生物科技有限公司（「邦耀生物」）宣布，首次對外公布了與浙江大學醫學院附屬第一醫院合作開展的「PD1敲除非病毒定點整合CD19-CART細胞治療復發難治性非霍奇金淋巴瘤的臨床試驗」取得突破性成果。這是世界上首次利用基因編輯技術在PD1位點實現定點整合的CART治療，也是全球首例非病毒定點整合CART細胞治療淋巴瘤的臨床試驗。同時，最新研究成果已於2020年9月23日在預印本平臺medRxiv上公布，由華東師範大學、浙江大學醫學院附屬第一醫院和上海邦耀生物共同完成。

PD1定點整合的CD19-CART是邦耀生物利用自主智慧財產權的Quikin CART™平臺技術，在不使用病毒載體的情況下，一步製備獲得的CART產品。該產品將PD1免疫檢查點抑制和CART腫瘤殺傷功能合二為一，起到了PD1免疫治療與CART療法聯合應用的效果。

2例患者在治療3個月後完全緩解

該臨床研究計劃入組患者15例，目前已可評估的4例患者在1個月時均達到了部分緩解（PR）的效果，已經達到3個月評估時間的2例患者獲得完全緩解(CR)。

首例獲得完全緩解的患者於2018年診斷為瀰漫大B淋巴瘤IVBE期，經多次放化療治療後，病情仍未得到有效控制。入組前影像學顯示左下腹小腸走形區繫膜間隙大小為3.6*3.5cm的病灶，放射性攝取異常增高。2020年5月入組進行PD1敲除非病毒定點整合CD19-CART細胞的回輸治療，治療後28天PET-CT影像學即顯示FDG代謝較前明顯減低，達到PR，治療90天後的PET-CT影像學顯示病灶全部消失，FDG代謝未見增高，達到CR。

在整個CART治療過程中未發生3級以上藥物相關不良事件，包括細胞因子風暴和神經毒性。回輸後，CART在體內擴增良好，持續時間較長，D90流式檢測發現外周血中的CART細胞仍維持在一定比例。目前2例患者已經痊癒出院，仍在接受長期隨訪。

患者治療前後影像學檢查對比

該項臨床研究的主要研究者（PI）浙江大學醫學院附屬第一醫院黃河院長說：「瀰漫性大B細胞淋巴瘤是最常見的非霍奇金淋巴瘤，目前針對難治復發的患者缺乏有效治療手段。今年我們開始探索基於基因編輯技術的非病毒定點整合型CART的臨床研究，我們非常高興的看到患者經過治療後迅速達到完全緩解狀態，我們期待這一新型的CART技術會為難治復發患者帶來更加便捷、安全和確切的長期治療效果。」

邦耀生物CART升級2.0版，更有效，更安全

邦耀生物的非病毒定點整合CART技術(Quikin CART™)，可以在不使用病毒載體的情況下，利用CRISPR/Cas9基因編輯技術將CAR元件定點插入到基因組的特定位點，一步實現基因敲除和CAR的穩定整合，屬於邦耀生物2.0版CART的管線產品。 

PD-L1/PD1是抑制T細胞功能的重要免疫檢查點，目前針對PD-L1/PD1的抑制劑已經在多種類型的惡性腫瘤中取得了良好的療效，也有不少研究報導了PD1敲除可有效增強CART細胞的功能。非霍奇金淋巴瘤是一種原發於淋巴組織的血液系統惡性腫瘤，佔所有淋巴瘤80%-90%，雖然患者在初次治療後疾病得到緩解，但之後往往出現復發。雖然已有CART產品獲批用於復發難治性非霍奇金淋巴瘤的臨床治療，但是總體療效依然有限，而有研究提示抑制PD1通路可能會帶來更好的臨床效果。

因此，邦耀生物利用Quikin CART™平臺開發了非病毒PD1定點整合CD19-CART細胞，開展復發難治性非霍奇金淋巴瘤的臨床治療。該產品具有CAR均一性穩定表達、PD1基因敲除的兩大優勢，相當於PD1抑制劑和CART細胞的強強聯手。在目前已經開展的多例臨床試驗中，該CART產品體現了出色的安全性和有效性。

傳統CART產品的製備主要使用病毒載體，對病毒製備工藝提出了很高的要求，這大大增加了CART細胞的製造成本和難度，阻礙了CART治療的大規模臨床應用；並且價格十分昂貴，如目前上市的CART產品，諾華的Kymriah定價為47.5萬美元，Kite的Yescarta定價為37.3萬美元；此外，由於病毒採用隨機插入的方式將CAR元件整合到細胞基因組中，可能會改變正常基因的表達，存在癌變的安全隱患。Quikin CART™技術無需採用病毒載體進行細胞製備，極大減少了CART產品的生產成本，同時避免了隨機插入的癌變風險。 

Quikin CART™技術只需一步即可同時實現T細胞內源基因的調控和CAR的持續性表達。相比於其他CART技術，具有工藝簡單、生產環節少、製備時間短、產品均一性高等優點。該技術平臺可以用於多個免疫檢查點敲除增強型CART細胞的製備，可以快速生產通用型CART細胞，可以開發動態調控的安全型CART產品等，為今後CART細胞的多樣化改造提供了強有力的技術支持。 

邦耀生物首席科學家，華東師範大學生命科學學院劉明耀教授表示：「與傳統的自體CART技術相比，Quikin CART™ 技術可以在不使用病毒的情況下，一步實現CAR元件在基因組的定點整合和T細胞內源基因的調控幹預。這意味著CART細胞的製備工藝、生產環節、製備時間都會大大簡化和縮短，因此極大降低了CART細胞的生產成本，同時減少了病毒隨機插入引起的致瘤風險，也提高了CART產品的均一性。目前結果顯示我們製備的非病毒PD1定點整合CD19-CART細胞具有巨大的治療潛力，在臨床試驗中表現出了很好的安全性和緩解率。」 

該項目主要負責人、論文第一作者，邦耀生物創新CART研發總監，華東師範大學生命科學學院副研究員張楫欽博士說：「近年來，CRISPR/Cas9基因編輯技術的不斷成熟和發展讓我們萌生了將其應用於CART治療的想法。通過對現有CART技術存在問題的深入剖析，我們意識到利用基因編輯技術來製備非病毒定點整合CART細胞是一個很有潛力的方向。通過大量的方法嘗試和條件摸索，我們建立了成熟的Quikin CART™技術平臺。該技術不需要使用任何病毒，只需一步即可製備出CART細胞，具有現有CART技術不可比擬的諸多優勢。期待今後利用這一技術平臺能開發出更多成功的CART產品，在臨床治療上取得更大的突破。」 

除了正在開展的非病毒PD1定點整合CD19-CART臨床研究，邦耀生物也正在布局針對實體瘤的其他非病毒定點整合CART產品，以期在CART療法上取得更大的突破。