嗜酸粒細胞直接計數試劑的幾種配方
一、嗜酸性粒細胞稀釋液:
試劑:
丙二醇(Propyleneglycol) 50ml
DW 50ml
10g/L石藍紅B水溶液 10ml
100g/L碳酸鈉水溶液 1.0ml
混均,過濾後室溫中保存可用一個月。
二、Hinkelmann液:
試劑:
伊紅 0.2g
95%石炭酸 0.5ml
40%甲醛 0.5ml
DW加至100ml,混均,過濾室溫備用
三、乙醇-伊紅稀釋液:
試劑:
95%乙醇 30ml
甘油 10ml
碳酸鉀 1.0g
枸櫞酸鈉 0.5g
20g/L伊紅液 10ml
DW加至100ml
混均、過濾後室溫保存。
本配方背景清晰,嗜酸細胞著色鮮明,缺點是含10%甘油,比較粘稠,
細胞不易混均,故計數前必須充分振搖,但用力不能太大,以免破壞細胞。
四、伊紅-丙酮稀釋液:
試劑:
20g/L伊紅液 5ml
丙酮 5ml
DW 90ml
混均、過濾室溫保存,新鮮配製效果好,每周配一次。
操作:
1、乾淨小試管加稀釋液0.38ml
2、取末梢血20ul,加入管內混均,待RBC溶解後兩側充池。
3、靜置3-5分鐘,用低倍鏡計數10個大方格內嗜酸粒細胞數。
4、計算:10各大方格內嗜酸細胞數×20×10的6次方=嗜酸
粒細胞數/L。
參考範圍:50-300×10的6次方/L
注意:血液稀釋後應於1小時內計數完,否則嗜酸細胞逐漸被
破壞,使結果偏低或不易辨認。混均力度適宜。